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w789xd

新虫 (初入文坛)

[交流] 求高效大提质粒的方法

大提质粒提了半个月,一直没有提出来,到最后跑胶总是全部降解,求各位大神有没有效率好的大提质粒的方法?

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380218013

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by w789xd at 2015-09-09 10:34:32
菌液里是有的,在加RNA酶之前跑过胶,质粒还在,但还是降解了很多,而做到最后一步就完全没有了。6000bp的质粒都变成了50bp左右。
...

个人认为用的试剂污染了,尤其是RNA酶。建议用新的试剂,用灭菌的枪头。
好好生活,努力赚钱
12楼2015-09-09 16:18:02
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查看全部 15 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
什么情况,手提的吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-09-08 11:44:27
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380218013

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先 你能确定你菌液里有你要的东西嘛?你怎么排除不是因为菌液里面本来就没有导致的,而是这么肯定是后期降解的?
其次 你最后溶解质粒的buffer可能污染了,含有DNA酶,换一个试试
最后 大抽一般买kit按说明书方法抽提,不会有问题的,质粒DNA很是稳定的。
好好生活,努力赚钱
3楼2015-09-08 12:52:25
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用天根质粒小提试剂盒提吧,很好用的。
4楼2015-09-08 16:30:17
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