| 查看: 2589 | 回复: 12 | |||
[交流]
pMD19T测序无信号 已有7人参与
|
|||
|
大家有没有用过TAKARA的pMD19T载体？ 我构建了4种质粒，自己PCR都没问题，但是用pMD19T的通用引物测序时，3家测序公司都说没有信号，华大说通用引物结合不上去，大家遇到过这个问题吗？ 是pMD19T载体的质量问题吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有170人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
Huobol
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 14473.1
- 散金: 70
- 红花: 7
- 帖子: 1274
- 在线: 162.9小时
- 虫号: 1214385
- 注册: 2011-02-26
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
自己PCR用到载体的通用引物了吗，一般用M13F-47和M13R-48，序列网上有，退火60℃即可，如果能P出亮的目的条带就对了。也可以对筛选出的阳性克隆进行进一步的检测，就是用自己的引物和通用引物做4个组合再进行PCR，其中只有两个组合能P出亮带，因为插入序列的方向不确定。比如，用特异引物和通用引物都是下游引物以及都是上游引物时才能P出条带，出现这种情况说明序列是反向插入的。自己检测试试吧，没问题的。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-09-07 14:14:14
xrxleisure
铜虫 (正式写手)
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 747.3
- 散金: 110
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 382
- 在线: 308.5小时
- 虫号: 3155466
- 注册: 2014-04-22
- 专业: 作物分子育种
2楼2015-09-07 13:54:12
4楼2015-09-07 14:29:17
5楼2015-09-07 15:25:06
6楼2015-09-07 15:26:05
7楼2015-09-07 15:29:16
8楼2015-09-07 15:31:00
9楼2015-09-07 15:32:41
大孙20111987
新虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 643.3
- 红花: 1
- 帖子: 143
- 在线: 32.3小时
- 虫号: 1413382
- 注册: 2011-09-22
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
10楼2015-09-07 15:39:30
100