| 查看: 2357 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
pMD19T测序无信号 已有7人参与
|
|||
|
大家有没有用过TAKARA的pMD19T载体？ 我构建了4种质粒，自己PCR都没问题，但是用pMD19T的通用引物测序时，3家测序公司都说没有信号，华大说通用引物结合不上去，大家遇到过这个问题吗？ 是pMD19T载体的质量问题吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有207人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
4楼2015-09-07 14:29:17
xrxleisure
铜虫 (正式写手)
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 747.3
- 散金: 110
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 382
- 在线: 308.5小时
- 虫号: 3155466
- 注册: 2014-04-22
- 专业: 作物分子育种
2楼2015-09-07 13:54:12
Huobol
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 14473.1
- 散金: 70
- 红花: 7
- 帖子: 1274
- 在线: 162.9小时
- 虫号: 1214385
- 注册: 2011-02-26
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
自己PCR用到载体的通用引物了吗，一般用M13F-47和M13R-48，序列网上有，退火60℃即可，如果能P出亮的目的条带就对了。也可以对筛选出的阳性克隆进行进一步的检测，就是用自己的引物和通用引物做4个组合再进行PCR，其中只有两个组合能P出亮带，因为插入序列的方向不确定。比如，用特异引物和通用引物都是下游引物以及都是上游引物时才能P出条带，出现这种情况说明序列是反向插入的。自己检测试试吧，没问题的。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-09-07 14:14:14
5楼2015-09-07 15:25:06