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5150416

新虫 (小有名气)

[交流] PCR目的基因

问一下大家在PCR时候有没有遇到像我这样的情况,就是怎么p就是p不出来,引物是重新换的,还是p不出来,你们将退货温度调到比设计的高多少或少多少,大家有木有好的方法,还请大家给个建议,谢谢!

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枭翔

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有没有别的非特异性条带?如果有的话,说明退火温度不合适;如果没有的话,那就不是退火温度的原因。引物看看有没有设计错误,尤其是反向引物,一般引物的质量没问题。你的模板是什么?gDNA?质粒?还是片段?PCR体系中加入5-10%的DMSO试一试。
祝试验顺利!
11楼2015-09-07 10:39:56
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