| 查看: 4322 | 回复: 2 | ||
小小技术官木虫 (正式写手)
|
[求助]
Filipin Staining 非律平细胞染色 UV 激发 看不到
|
|
各位虫友，大家好。实验遇到问题，求助大家，如果谁做过这个非律平细胞染色，麻烦指导一下，不胜感激！ 最近在做一个胆固醇相关的课题，查阅文献得知 Filipin（一种抗真菌抗菌素） 菲律宾菌素可以特异性 结合游离的胆固醇， 然后再紫外激发下呈现特异荧光。 我操作的具体步骤： 1. 爬片 2.PBS ×3, 5min 3.4% 多聚甲醛固定 15min 4.PBS ×3, 5min 5.染色 2h (Filipin Complex: Sigma (F-9765) Stock: 50 mg/ml in DMSO final concentration 0.05 mg/ml in PBS Protect filipin solutions from light ) 备注：12孔板，用了500ul工作液（不知道是否太少了点，一般免疫荧光孵抗体的话是够用了） 6.PBS ×3, 5min 7.普通免疫荧光显微镜 紫外激发 有些非特异点 确定不是细胞内的 ps. 网上的步骤中，指出多聚甲醛固定后 需要用甘氨酸（CHIP实验是需要这一步来终止多聚甲醛的）或者氯化铵终止 多聚甲醛，这一步真的需要吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
278求调剂
已经有15人回复
-
284求调剂
已经有15人回复
-
293调剂
已经有16人回复
-
273求调剂
已经有45人回复
-
22408 266求调剂
已经有13人回复
-
266求调剂
已经有15人回复
-
一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂
已经有9人回复
-
生物学328分求调剂
已经有4人回复
-
277求调剂
已经有6人回复
-
265求调剂
已经有21人回复
小小技术官
木虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 4529.4
- 散金: 248
- 红花: 6
- 帖子: 768
- 在线: 232.5小时
- 虫号: 1972611
- 注册: 2012-09-04
- 性别: GG
- 专业: 常微分方程与动力系统
2楼2015-09-06 21:08:43
3楼2019-12-10 14:47:22
