24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 593  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jiawater85

木虫 (正式写手)

[交流] 求高手 RNA提取

我提取RNA后,用分光光度计测量比值,A260/A280小于1.5,做PCR后管家基因还可以,但其他基因组间差别太大,重复性太差,请教那一步出问题了?

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:09 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵敏9565

铁虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流奖
jiawater85  
但其他基因组间差别太大,重复性太差,请教那一步出问题了?


“其他基因组间”是什么意思?
如果你是在半定量PCR,重复性差的话,你应该考虑是否要减少PCR循环次数。

如果你对RNA质量要求很高的,你可以对提取RNA进行纯化,用不含Rnase的DNA酶消化后,再沉淀RNA,(具体方法很容易找,如果找不到,可以问我要),如果经济情况哈,可以用QIAgen的柱子纯化,效果会更好。
5楼2008-08-26 21:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):感谢答复
小于1.5其实还是没什么所谓的~~~一般都能做出来
要说原因的话,肯定是其他的有机物质(如蛋白)的污染
如果真的很担心的话,我记得QIAGEN有出一种新的产品,辅助trizol法的
就是会在trizol层与上清层之间形成一个坚硬的防护层,这样吸取的时候就不会吸到trizol
其他基因组间差别太大?
是不是在逆转录之前没有将RNA稀释到同一个浓度?
我感觉提出来的RNA质量倒不是一个什么大问题,有时候我也会提得很糟糕
降解到比值为10或者污染到只有1.3左右,都能做出来~~没什么大问题
2楼2008-08-26 09:20:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raindrop8316

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 我爱吃水果 at 2008-8-26 10:23:
楼上的很强哦

做RT-PCR对RNA的要求确实很低
书到用时方恨少 钱到月底不够花
4楼2008-08-26 16:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxl0558-0

很想知道 三磷酸腺苷楼上和 raindrop8316楼上的联系方式
6楼2008-08-27 11:03:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295求调剂 +3 1428151015 2026-03-27 3/150 2026-03-27 19:24 by wxiongid
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +14 荷包蛋hyj 2026-03-26 14/700 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +9 vv迷 2026-03-22 9/450 2026-03-27 15:59 by 不吃魚的貓
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利|求调剂 +3 Micky11223 2026-03-25 3/150 2026-03-27 14:52 by 醉在风里
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 303求调剂 +7 安忆灵 2026-03-22 8/400 2026-03-27 11:46 by sanrepian
[考研] 334求调剂 +3 雨清天晴 2026-03-21 3/150 2026-03-27 11:30 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
信息提示
请填处理意见