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科研屌丝007

新虫 (小有名气)

[交流] pGL3-Basic重组质粒构建问题 已有2人参与

最近打算使用pGL3-Basic载体来研究启动子转录活性,查阅相关文献、论坛,其中存在几点疑虑,希望有经验的大神能够指点一二:

首先,请问各位是如何确定启动子区域的?通过什么网站,或者有什么特征序列?我现在手里有目的基因起始密码子上游约600bp序列,网站预测到该区域内有一个CpG 岛。

第二,是否有必要将第一外显子序列也一并克隆到pGL3-Basic载体?

第三,扩增片段中的ATG密码子是否会影响luc的表达?

欢迎大家参与讨论,谢谢!
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bingzizi

捐助贵宾 (小有名气)


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2楼2015-12-23 13:32:16
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yl1092565413

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第一个5'UTR的序列都不能构建进去
3楼2017-04-13 19:25:07
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