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科研屌丝007

新虫 (小有名气)

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专业: 水产生物免疫学与病害控制

[交流] pGL3-Basic重组质粒构建问题已有2人参与

最近打算使用pGL3-Basic载体来研究启动子转录活性，查阅相关文献、论坛，其中存在几点疑虑，希望有经验的大神能够指点一二：

首先，请问各位是如何确定启动子区域的？通过什么网站，或者有什么特征序列？我现在手里有目的基因起始密码子上游约600bp序列，网站预测到该区域内有一个CpG 岛。

第二，是否有必要将第一外显子序列也一并克隆到pGL3-Basic载体？

第三，扩增片段中的ATG密码子是否会影响luc的表达？

欢迎大家参与讨论，谢谢！

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