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科研屌丝007新虫 (小有名气)
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pGL3-Basic重组质粒构建问题 已有2人参与
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最近打算使用pGL3-Basic载体来研究启动子转录活性,查阅相关文献、论坛,其中存在几点疑虑,希望有经验的大神能够指点一二: 首先,请问各位是如何确定启动子区域的?通过什么网站,或者有什么特征序列?我现在手里有目的基因起始密码子上游约600bp序列,网站预测到该区域内有一个CpG 岛。 第二,是否有必要将第一外显子序列也一并克隆到pGL3-Basic载体? 第三,扩增片段中的ATG密码子是否会影响luc的表达? 欢迎大家参与讨论,谢谢! |
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