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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC流动相中水比例较高时，必须选用耐水的色谱柱吗？
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lenka.ctt

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC流动相中水比例较高时，必须选用耐水的色谱柱吗？ 已有4人参与

使用HPLC检测柠檬酸，有机酸极性较大，流动相中水的比例又比较高，看到有的文献中说道这种情况下色谱柱容易疏水塌陷，因此要选用较耐水的色谱柱。但是实验室的是Ultimate XB-C18柱，属于常规柱和对强碱性化合物有较好分离效果的柱子，可以在流动相中水比例较高的情况下拿来分离检测柠檬酸吗？求大神告知。
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1楼 2015-08-31 17:44:15
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

巫女子佩

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
现在常规反相柱都能耐95%的水，所以不必过分担心
你的样品酸度挺高的，如果流动相条件是高酸度的话，需要在意的是选耐酸的柱子
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6楼2015-09-01 12:18:52
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好使用HILIC之类的色谱柱或者耐水色普柱，不过现在色谱柱质量都还行，只要有机溶剂大于5%，就可以使用一般C18，但是不要长时间用
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7楼2015-09-01 14:04:48
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copeal

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lenka.ctt: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-01 18:39:42
有机相大于5%基本上就不会发生疏水塌陷了。

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2楼2015-08-31 19:07:14
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lenka.ctt

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by copeal at 2015-08-31 19:07:14
有机相大于5%基本上就不会发生疏水塌陷了。

文献中大部分用的是PH2.8的Na2HPO4水溶液做流动相，可以配成5%的甲醇来做吗？
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3楼2015-09-01 08:54:26
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copeal

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lenka.ctt at 2015-09-01 08:54:26
文献中大部分用的是PH2.8的Na2HPO4水溶液做流动相，可以配成5%的甲醇来做吗？...

PH2.8的Na2HPO4水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，利用液相仪的泵进行配比，寻找合适的比例。B即为有机相，它的比例大于5%即不用担心疏水塌陷的问题。

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4楼2015-09-01 09:02:52
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普通回帖

lenka.ctt

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by copeal at 2015-09-01 09:02:52
PH2.8的Na2HPO4水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，利用液相仪的泵进行配比，寻找合适的比例。B即为有机相，它的比例大于5%即不用担心疏水塌陷的问题。
...

再麻烦您解答一下，”寻找合适的比例“，是怎么来确定呢？
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5楼2015-09-01 09:49:38
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
基本上现在大部分柱子都可以忍受短时间纯水的洗礼，同时只要有5%的有机相可以不要特殊柱子
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8楼2015-09-01 16:59:58
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lenka.ctt

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 巫女子佩 at 2015-09-01 12:18:52
现在常规反相柱都能耐95%的水，所以不必过分担心
你的样品酸度挺高的，如果流动相条件是高酸度的话，需要在意的是选耐酸的柱子

流动相是PH2.8的Na2HPO4水溶液，是不是也属于强酸性呢？
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9楼2015-09-01 18:38:36
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lenka.ctt

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wyy080214 at 2015-09-01 14:04:48
最好使用HILIC之类的色谱柱或者耐水色普柱，不过现在色谱柱质量都还行，只要有机溶剂大于5%，就可以使用一般C18，但是不要长时间用

样品很多，估计要测一周，是不是不行
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10楼2015-09-01 18:39:13
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