应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如何对丝状真菌（如灰葡萄孢）细胞器进行GFP、RFP双标记？？~~~~~~~~~~~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1168  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

propamidine

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 如何对丝状真菌（如灰葡萄孢）细胞器进行GFP、RFP双标记？？~~~~~~~~~~~ 已有1人参与

如题：如何对丝状真菌（如灰葡萄孢）细胞器进行GFP、RFP双标记？
      本人对分子生物学、基因工程是门外汉。
      因课题需要，现欲对丝状真菌（如灰葡萄孢）进行GFP、RFP双标记，分别标记细胞核、线粒体。
      最终目的是在激光共聚焦显微镜下直接观察细胞核、线粒体的亚细胞定位。
      不知道如何进行....包括：
     1、基本流程是什么？
     2、序列如何选择？
     3、载体如何选择和构建？
     4、用酵母还是农杆菌转化？如何转化？
     等等问题....因为不懂，都不知道该问些什么
     希望虫友能帮助，指点迷津。
     提前感谢虫友的帮助！！谢谢！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-08-31 16:45:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qilinhuang

新虫 (初入文坛)
楼主有没有做成功啦？我最近也要做，没有头绪呢，希望您能指点指点啊！拜托拜托！
赞一下 回复此楼
3楼2016-09-06 10:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
propamidine: 金币+20, ★★★很有帮助, 你好，具体的protocol（傻瓜式的。。。）或者文献能推荐吗？我也找不到类似的中文论文或文献。 2015-08-31 22:30:38
首先，你需要合适的载体系统，真菌必须对筛选标记敏感，你想进行双标记，可以考虑同时转化两个载体进去或者分两次转，丝状真菌的转化可以考虑走原生质体途径或者借助农杆菌

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-31 18:47:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花落已季末

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-08-31 18:47:11
首先，你需要合适的载体系统，真菌必须对筛选标记敏感，你想进行双标记，可以考虑同时转化两个载体进去或者分两次转，丝状真菌的转化可以考虑走原生质体途径或者借助农杆菌
...

你好，我在做真菌转化，原生质体和农杆菌都尝试过，但一直没有成功，可否分享一下这方面的经验？
赞一下 回复此楼
流年似水，看不透的是红尘中镜花水月；往事如烟，挥不去的是岁月荏苒一过往；待得繁华落尽，只余回忆。
4楼2016-11-14 10:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂，一志愿南农083200食品科学与工程 +4 XQTJZ 2026-03-26 4/200 2026-03-27 01:23 by dgnhs
[考研] 材料学硕333求调剂 +7 北道巷 2026-03-24 7/350 2026-03-27 00:30 by wxiongid
[考研] 304材料求调剂 +3 钟llll 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:05 by Dyhoer
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +6 小小甜面团 2026-03-25 6/300 2026-03-26 23:01 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +3 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:35 by 求调剂zz
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭