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lybio金虫 (正式写手)
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[交流]
质粒转入真菌,必须将其线性化吗?
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大家好!构建好的质粒要与曲霉的基因组继续同源重组,采用PEG-原生质体法必须将它线性化才能转入吗?还是只要质粒就行?有人用过醋酸锂转染曲霉吗,它的优点是不是不需要制备原生质体,更方便? 我是采用PEG-原生质体法,用构建好的质粒PCR扩增出需要同源重组的基因片断,将它转入原生质体。反复做了5批,前3批都是用于摸索制备原生质体的条件,后两批均未转化出菌,很是着急。希望能够得到大家的帮忙,转化过程中还要注意什么,谢谢! |
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