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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 用于真菌培养的PDA培养基 是在 灭菌锅处理后 加入氯霉素 还是 灭菌前就加？
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liyuanZ

捐助贵宾 (知名作家)

环能虫

[求助] 用于真菌培养的PDA培养基 是在 灭菌锅处理后 加入氯霉素 还是 灭菌前就加？ 已有5人参与

如题。
我想用氯霉素进一步保证真菌培养中不会被细菌干扰，但是不知道氯霉素是在高温高压灭菌   前   加进去还是在高温高压灭菌   后   加进去。
谢谢各位！
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领悟-提高
1楼 2015-08-28 17:24:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

crb123000

金虫 (小有名气)
小瓶子装的氯霉素，瓶子外壁需要用75%酒精消毒，瓶口用酒精火焰烧片刻

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10楼2015-08-29 21:22:17
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coelicolor

金虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by liyuanZ at 2015-09-02 08:39:29
再问下，那母液是否在每次使用前进行紫外灭菌？...

母液配置好、超净台中用一次性注射器加无菌滤头过滤除菌、分装到灭菌的Ep中、直接打到里面也行。-20摄氏度放置、用一只取一只。

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要有最遥远的梦想
20楼2015-09-02 08:45:55
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longfei1125

铜虫 (正式写手)
氯霉素是用无水乙醇配置，直接溶解后用Ep管分装即可（最多过膜处理，无需紫外）。待培养基冷却至60℃后按比例加入，然后倒平板。详见《分子克隆》。这些是基因操作最基本的东西，但是很多微生物的人都不懂，实验操作书上也没有
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DNA表观遗传学
24楼2015-09-02 11:35:14
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博学善思

新虫 (小有名气)
不需要吧，我们一般一次配多些，过滤除菌后，分装到1.5ml Ep管中，-20℃保存。总是提前拿出解冻。没有发现污染情况，不过你解冻的时候放在紫外下照，应该也没事。

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新浪微博：博学善思work
21楼2015-09-02 08:47:12
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普通回帖

crb123000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liyuanZ: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢，是在无菌操作台里面加吗？ 2015-08-29 17:15:29
灭菌冷却到60℃后添加。

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2楼2015-08-29 13:17:43
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下页为你流泪

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liyuanZ: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢，我这个不加琼脂。实在无菌操作台里加吗？ 2015-08-29 17:15:51
先灭菌，灭好之后，待其冷却到60℃左右，加入氯霉素，轻轻混合均匀，避免产生气泡。然后就是倒板啦，动作要快不然很容易凝固。

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啦啦啦啦啦
3楼2015-08-29 13:51:51
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发挥出

金虫 (小有名气)
使用之前再加。

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4楼2015-08-29 14:11:13
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liyuanZ

捐助贵宾 (知名作家)

环能虫
引用回帖:
4楼: Originally posted by 发挥出 at 2015-08-29 14:11:13
使用之前再加。

谢谢，是在无菌操作台里加吗？
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领悟-提高
5楼2015-08-29 17:16:20
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devil小斌

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liyuanZ: 金币+5, 谢谢哦，可以用无菌水配好氯霉素然后紫外灭菌处理吗？ 2015-08-30 12:18:37
灭菌后冷却加，氯霉素溶液可以用过滤膜灭菌。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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人活争口气~
6楼2015-08-29 17:40:15
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发挥出

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liyuanZ at 2015-08-29 17:16:20
谢谢，是在无菌操作台里加吗？...

是的！超净台里加。

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7楼2015-08-29 17:40:18
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发挥出

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 发挥出 at 2015-08-29 17:40:18
是的！超净台里加。
...

一般是手摸上去不烫了，就可以加抗生素了。

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8楼2015-08-29 17:41:51
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crb123000

金虫 (小有名气)
要在无菌台操作。

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9楼2015-08-29 21:18:59
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