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liyuanZ

捐助贵宾 (知名作家)

环能虫

[求助] 用于真菌培养的PDA培养基 是在 灭菌锅处理后 加入氯霉素 还是 灭菌前就加? 已有5人参与

如题。
我想用氯霉素进一步保证真菌培养中不会被细菌干扰,但是不知道氯霉素是在高温高压灭菌   前   加进去还是在高温高压灭菌   后   加进去。
谢谢各位!
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领悟-提高
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crb123000

金虫 (小有名气)

小瓶子装的氯霉素,瓶子外壁需要用75%酒精消毒,瓶口用酒精火焰烧片刻

发自小木虫Android客户端
10楼2015-08-29 21:22:17
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coelicolor

金虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by liyuanZ at 2015-09-02 08:39:29
再问下,那母液是否在每次使用前进行紫外灭菌?...

母液配置好、超净台中用一次性注射器加无菌滤头过滤除菌、分装到灭菌的Ep中、直接打到里面也行。-20摄氏度放置、用一只取一只。

[ 发自小木虫客户端 ]
要有最遥远的梦想
20楼2015-09-02 08:45:55
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longfei1125

铜虫 (正式写手)

氯霉素是用无水乙醇配置,直接溶解后用Ep管分装即可(最多过膜处理,无需紫外)。待培养基冷却至60℃后按比例加入,然后倒平板。详见《分子克隆》。这些是基因操作最基本的东西,但是很多微生物的人都不懂,实验操作书上也没有
DNA表观遗传学
24楼2015-09-02 11:35:14
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博学善思

新虫 (小有名气)

不需要吧,我们一般一次配多些,过滤除菌后,分装到1.5ml Ep管中,-20℃保存。总是提前拿出解冻。没有发现污染情况,不过你解冻的时候放在紫外下照,应该也没事。

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新浪微博:博学善思work
21楼2015-09-02 08:47:12
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普通回帖

crb123000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liyuanZ: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢,是在无菌操作台里面加吗? 2015-08-29 17:15:29
灭菌冷却到60℃后添加。

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2楼2015-08-29 13:17:43
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下页为你流泪

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liyuanZ: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢,我这个不加琼脂。实在无菌操作台里加吗? 2015-08-29 17:15:51
先灭菌,灭好之后,待其冷却到60℃左右,加入氯霉素,轻轻混合均匀,避免产生气泡。然后就是倒板啦,动作要快不然很容易凝固。

[ 发自小木虫客户端 ]
啦啦啦啦啦
3楼2015-08-29 13:51:51
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发挥出

金虫 (小有名气)

4楼2015-08-29 14:11:13
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liyuanZ

捐助贵宾 (知名作家)

环能虫

引用回帖:
4楼: Originally posted by 发挥出 at 2015-08-29 14:11:13
使用之前再加。

谢谢,是在无菌操作台里加吗?
领悟-提高
5楼2015-08-29 17:16:20
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devil小斌

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liyuanZ: 金币+5, 谢谢哦,可以用无菌水配好氯霉素然后紫外灭菌处理吗? 2015-08-30 12:18:37
灭菌后冷却加,氯霉素溶液可以用过滤膜灭菌。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
人活争口气~
6楼2015-08-29 17:40:15
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发挥出

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liyuanZ at 2015-08-29 17:16:20
谢谢,是在无菌操作台里加吗?...

是的!超净台里加。

发自小木虫Android客户端
7楼2015-08-29 17:40:18
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发挥出

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 发挥出 at 2015-08-29 17:40:18
是的!超净台里加。
...

一般是手摸上去不烫了,就可以加抗生素了。

发自小木虫Android客户端
8楼2015-08-29 17:41:51
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crb123000

金虫 (小有名气)

9楼2015-08-29 21:18:59
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