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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 做western blot 之前，需要给细胞48h的药和一定时间的生长因子，请问一般先给哪个？
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only123abc

银虫 (小有名气)

[求助] 做western blot 之前，需要给细胞48h的药和一定时间的生长因子，请问一般先给哪个？ 已有1人参与

各位大神同僚，同上，做western blot 之前，需要给细胞48h的药和一定时间的生长因子，请问一般先给哪个？还有，生长因子的作用时间和浓度怎么确定？？文献基本上是先给药，但是师姐和老师倾向于先给因子，怎么办？？给药是抑制细胞各项生理功能，生长因子是激活各项功能，怎么做更科学？
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1楼 2015-08-26 15:54:56
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
only123abc: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢~文献是先给药的，但是我不明白原因，觉得先给因子激活细胞通路再给药抑制才是合理的，这个对不对呢？ 2015-08-27 09:04:11
嗯，你这个问题很难回答的，因为别人不清楚你实验的目的和具体的设计。

建议你找及几篇比较经典权威的文献，和你的实验目的相似的照着他们的方法来。
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2楼2015-08-26 23:37:54
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)
我觉得可能是这样的，因为我经历过的抑制剂都是比较短时程的处理，一般不超过60分钟。但是我们一般都是先给抑制剂，比如我们要给EGF刺激，为了说明是EGF特异引起的作用，首先给予EGF的抑制剂（为了1、抑制剂对细胞发挥作用需要一定时间，必须先让抑制剂进入细胞发挥功效；2、将本底或内源的EGF也抑制住要先加抑制剂），然后再给予EGF。
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3楼2015-09-02 10:54:21
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