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ly476779208银虫 (初入文坛)
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[求助]
PCR后电泳的结果好奇怪，求帮忙分析。 已有2人参与
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PCR做了两个片段，A:1245bp；B1：2982bp；B2：2982bp PCR体系如下： 试剂 体积（ 20ul） ddH2O 9.6ul 10 x buffer 4ul 10×dNTP（2 .5mM）2ul 上游Primer（10 μM) 1ul 下游Primer（10 μM) 1ul 模板（123 ng/mL ) 2ul 酶 0.4ul PCR条件： 98℃ 30s 98℃ 10s 55℃ 30s 72℃/68℃ Xmin goto 5× 98℃ 30s 98℃ 10s 57℃ 30s 72℃/68℃ Xmin goto 28× 72℃/68℃ 10min 4℃ 保存 三个样，每个做了四管，先mix后分装，同一个体系配置的。1kb marker A用GXL酶P的，所以延伸温度是68℃，电泳后结果不错，条带明亮，至今做过的最好的……（新手QAQ） B1，B2用的phusion酶，延伸温度72℃，电泳后条带如图。 不知道为什么会出现这种条带有的没有，有的明亮有的暗淡的现象，因为是一个体系配的呀，确定各组分都加了。那么出现这种结果的原因是什么呢，明亮的条带是正确的吗？  A电泳结果 条带明亮.png  B1.png  B2.png |
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