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xiao杉儿金虫 (小有名气)
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[求助]
肝微粒体实验中代谢稳定性问题 已有3人参与
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恳请各位大神帮帮忙！！ 本人现在在做一个单一成分的肝微粒体体外代谢实验 情况一：孵育时间考察中，发现其代谢稳定性很乱，用大鼠肝微粒体做，底物浓度（20uM），蛋白浓度0.5 mg/ml，设0-120min的孵育时间，最终有时能降20~30%，有时又只有百分之几的变化，且中间有的点不降反增。 情况二：选了某次稳定性实验中代谢了15%的时间点（30min），蛋白浓度（0.75mg/ml，已考察）做底物浓度的考察，发现中间仍有某些点没有规律性的变化，但各浓度点有代谢30~40%，排除这些点后总体的代谢速率在上升，且呈线性。 情况三：选用上述在线性范围内的某底物浓度（60uM），再次用大鼠肝微粒体做代谢稳定性实验，发现代谢依然不稳定，重做，在60min时也只有百分之几的代谢。 现在实验一直停滞不前了，按筛选出的条件做得不到前面实验的结果（如与孵育时间和底物浓度实验代谢情况比 ），请各位大神不吝赐教，谢谢！！！！ |
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