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xiao杉儿金虫 (小有名气)
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肝微粒体实验中代谢稳定性问题 已有3人参与
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恳请各位大神帮帮忙!! 本人现在在做一个单一成分的肝微粒体体外代谢实验 情况一:孵育时间考察中,发现其代谢稳定性很乱,用大鼠肝微粒体做,底物浓度(20uM),蛋白浓度0.5 mg/ml,设0-120min的孵育时间,最终有时能降20~30%,有时又只有百分之几的变化,且中间有的点不降反增。 情况二:选了某次稳定性实验中代谢了15%的时间点(30min),蛋白浓度(0.75mg/ml,已考察)做底物浓度的考察,发现中间仍有某些点没有规律性的变化,但各浓度点有代谢30~40%,排除这些点后总体的代谢速率在上升,且呈线性。 情况三:选用上述在线性范围内的某底物浓度(60uM),再次用大鼠肝微粒体做代谢稳定性实验,发现代谢依然不稳定,重做,在60min时也只有百分之几的代谢。 现在实验一直停滞不前了,按筛选出的条件做得不到前面实验的结果(如与孵育时间和底物浓度实验代谢情况比 ),请各位大神不吝赐教,谢谢!!!! |
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xiao杉儿
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