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新的自我100

金虫 (初入文坛)

[求助] 提质粒跑胶 已有4人参与

提出的质粒跑胶结果要怎么分析,要怎么和Marker比较来判断是否其是否正确?谢谢!
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新的自我100

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ksws0465326 at 2015-08-26 10:32:49
环状DNA跑电泳也可以看大小,和线状的迁移率没差那么大,根据marker的大小,也就是看个大概,想要确切认证是否正确插入片段,只能测序

但环状的跑出的条带大小并不正确,所以质粒跑胶结果只是看够不够亮,浓度够不够,这样理解对吗?
7楼2015-08-26 10:35:32
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Huobol

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
新的自我100: 金币+1, 有帮助 2015-08-26 14:58:45
插入目的片段后的重组质粒的大小是可以算的,比如2692 bp的pMD19-T载体,其重组质粒大小就等于2692加插入的目的片段的大小,这样质粒电泳后参照Marker就知道重组质粒条带的大致位置了。最后还是要测序验证。

发自小木虫Android客户端
让羽毛再飞一会儿
2楼2015-08-26 01:52:35
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新的自我100

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Huobol at 2015-08-26 01:52:35
插入目的片段后的重组质粒的大小是可以算的,比如2692 bp的pMD19-T载体,其重组质粒大小就等于2692加插入的目的片段的大小,这样质粒电泳后参照Marker就知道重组质粒条带的大致位置了。最后还是要测序验证。
...

但提出的质粒不是环状吗?大小不能那么看吧?
3楼2015-08-26 09:24:07
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
新的自我100: 金币+1, 有帮助 2015-08-26 14:59:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by 新的自我100 at 2015-08-26 09:24:07
但提出的质粒不是环状吗?大小不能那么看吧?...

加入限制性内切酶酶切后,不就是线性了,这样跑胶不就可以比对了
4楼2015-08-26 09:36:08
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