应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达出来大小不对问题
61/1返回列表
查看: 2518  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hellololo

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达出来大小不对问题 已有2人参与

请教各位虫友，我有一个蛋白大肠表达出来SDS-PAGE检测蛋白大小比预测和文献报道的大了10多KDa，loading buffer里面加了巯基乙醇，会不会还是二聚体形成的问题呢？如何确定是不是形成了二聚体呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-08-25 19:10:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellololo

金虫 (小有名气)
然后我想将这个蛋白做毕赤酵母分泌性表达，但是一直表达不出来，会不会是糖基化位点修饰造成的呢？请问有过这方面文献报道吗
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-25 19:13:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hellololo: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-08-26 10:31:09
表达量如何？先确定是你的蛋白，western或者质谱什么的~通过分析超离、native-page检测聚合状态~
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-26 09:31:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

535390882

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hellololo: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-08-26 10:31:28
首先，大肠杆菌里面没有糖基化这种功能，因此可以排除糖基化导致蛋白变大的可能性。
其次，基本上根据你的基因序列翻译出来的蛋白有多大就有多大喽，还有载体上可能带有的标签什么的会让蛋白变大。
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-26 10:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellololo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a86052 at 2015-08-26 09:31:35
表达量如何？先确定是你的蛋白，western或者质谱什么的~通过分析超离、native-page检测聚合状态~

大肠表达量还可以，并且后面实验也确定就是目的蛋白，就是大小问题，你说的这些方法我可以试试看，谢谢你啦
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-26 10:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellololo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 535390882 at 2015-08-26 10:25:35
首先，大肠杆菌里面没有糖基化这种功能，因此可以排除糖基化导致蛋白变大的可能性。
其次，基本上根据你的基因序列翻译出来的蛋白有多大就有多大喽，还有载体上可能带有的标签什么的会让蛋白变大。

感谢朋友的回复，是的，大肠表达没有糖基化修饰，我说的是毕赤酵母表达，真核的，不知道糖基化对这个酵母表达有没有影响
标签我也计算在内了，但是就是大了10多KDa，真的很奇怪
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-26 10:33:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hellololo 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +3 wangyl_123 2026-10-10 6/300 2026-10-11 15:04 by Abin0406
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 5/250 2026-10-11 09:00 by 好运来～9527
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭