| 查看: 1652 | 回复: 2 | |||
[求助]
二代测序的问题 已有1人参与
|
|
昨天刚接触二代测序，有很多问题不懂，可能大神会觉得这些问题很幼稚，但是 还是恳请能够详细回答一下 二代测序中 末端补平的作用是什么？ 割胶纯化这一步骤， DNA不是双链结构吗？如果是，那为什么需要留下连接完整的产物，去掉残缺不全的？而且，割胶会不会去掉接头？ |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有285人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
gaoyang636
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 202 (大学生)
- 金币: 4111.4
- 散金: 7
- 红花: 14
- 帖子: 1108
- 在线: 159.8小时
- 虫号: 384065
- 注册: 2007-05-27
- 专业: 基因组学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxfldn: 回帖置顶 2015-08-26 08:32:01
sxfldn: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-26 08:32:29
感谢参与，应助指数 +1
sxfldn: 回帖置顶 2015-08-26 08:32:01
sxfldn: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-26 08:32:29
|
严谨一点的话，应该请你把你看的这个protocol发一下，才好解答。 目前我姑且认为你在问的是传统建库步骤的问题。 末端补平是因为前一步的物理打断步骤产生的DNA片段两端有可能为长短不一的粘端，需要先补平，再形成1bp的A碱基的小粘端，才能较高效地连接带T粘端的接头。 切胶是为了选择合适大小的DNA片段，与双链与否没啥特殊关系。并且理论上通过切胶一般也达不到”选择完整“”去除不全“的DNA片段的目的。 如果切胶选择的size比较大，可以比较有效的去除接头及二聚体。 PS：现在切胶用的少了，常用的是AMPure Beads磁珠处理。 |
2楼2015-08-25 10:32:11
3楼2015-08-26 08:30:52
10