| 查看: 1719 | 回复: 2 | |||
[求助]
二代测序的问题 已有1人参与
|
|
昨天刚接触二代测序，有很多问题不懂，可能大神会觉得这些问题很幼稚，但是 还是恳请能够详细回答一下 二代测序中 末端补平的作用是什么？ 割胶纯化这一步骤， DNA不是双链结构吗？如果是，那为什么需要留下连接完整的产物，去掉残缺不全的？而且，割胶会不会去掉接头？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有143人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
gaoyang636
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 202 (大学生)
- 金币: 4111.4
- 散金: 7
- 红花: 14
- 帖子: 1108
- 在线: 159.8小时
- 虫号: 384065
- 注册: 2007-05-27
- 专业: 基因组学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxfldn: 回帖置顶 2015-08-26 08:32:01
sxfldn: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-26 08:32:29
感谢参与，应助指数 +1
sxfldn: 回帖置顶 2015-08-26 08:32:01
sxfldn: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-26 08:32:29
|
严谨一点的话，应该请你把你看的这个protocol发一下，才好解答。 目前我姑且认为你在问的是传统建库步骤的问题。 末端补平是因为前一步的物理打断步骤产生的DNA片段两端有可能为长短不一的粘端，需要先补平，再形成1bp的A碱基的小粘端，才能较高效地连接带T粘端的接头。 切胶是为了选择合适大小的DNA片段，与双链与否没啥特殊关系。并且理论上通过切胶一般也达不到”选择完整“”去除不全“的DNA片段的目的。 如果切胶选择的size比较大，可以比较有效的去除接头及二聚体。 PS：现在切胶用的少了，常用的是AMPure Beads磁珠处理。 |
2楼2015-08-25 10:32:11
3楼2015-08-26 08:30:52
投票:
10