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Z.Ada

铁虫 (小有名气)

应该是胶的问题,我用的是1%,100V的,多做几次就好了,刚开始问题多正常,Fighting

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
11楼2015-08-26 09:15:41
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amay0001

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
呦呦奶茶: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-08-26 21:58:35
PCR: 退火温度就定56度,先看到条带再说
胶:我买过299的微波炉,跟导师商量一下还是配一个吧,很影响进度的。片段多大?2%的浓度太高了,一般200bp的1%的胶PCR产物没问题。
上样:PCR产物一般DNA浓度高,上样量3-5ul看结果即可
12楼2015-08-26 09:38:15
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 半醒半梦 at 2015-08-26 01:02:09
marker没出来,说明胶有问题,检查配胶电泳液,电泳槽电泳液换新的,煮胶让琼脂糖完全融化。

OK,谢谢啦!今天再试试。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
13楼2015-08-26 09:41:48
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535390882

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有没有怀疑过MIX的问题? 质量太差的MIX会导致特异性差等问题
14楼2015-08-26 10:00:55
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929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你染色的时候,有没有问题?拿什么染色的
想你没话说
15楼2015-08-26 10:08:39
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by amay0001 at 2015-08-26 09:38:15
PCR: 退火温度就定56度,先看到条带再说
胶:我买过299的微波炉,跟导师商量一下还是配一个吧,很影响进度的。片段多大?2%的浓度太高了,一般200bp的1%的胶PCR产物没问题。
上样:PCR产物一般DNA浓度高,上样量3 ...

我正在试呢,用1%和1.5%都试试,100V,但愿能有个好结果。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
16楼2015-08-26 11:58:27
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 929519755 at 2015-08-26 10:08:39
你染色的时候,有没有问题?拿什么染色的

是BioTake的核酸染料

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
17楼2015-08-26 12:01:39
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 535390882 at 2015-08-26 10:00:55
有没有怀疑过MIX的问题? 质量太差的MIX会导致特异性差等问题

还真没怀疑过,我用的lifefeng的含燃料的Mix,今天再试试,不行明天借同学的再试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
18楼2015-08-26 12:06:49
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WOAIDACHANG

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

19楼2015-08-26 15:00:07
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呀薯条

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
呦呦奶茶: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢哦,今天重新改了胶浓度和电压,做出来的结果还不错 2015-08-26 22:02:32
marker都看不到的话,我也出现过,发现可能是以下原因造成的:染色液没有充分溶解或混匀;也可能是染色液质量问题。我就是因为染色液的质量问题,那一阵电泳一直没结果,后来换了一种立马清楚。
电泳时,最好确保胶彻底凝固好再使用
20楼2015-08-26 19:12:53
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