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coco_song

金虫 (正式写手)

[交流] 有关Western blot 问题 截止日期08年8月30日

本人今天做Western blot 时,显影结果跟平时的相反:有条带的地方是白色,背景是一片黑.而平时抗体好的话,只出现一条黑色的目的带,请问怎么解释这个现象.

[ Last edited by coco_song on 2008-8-23 at 20:58 ]

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hyy9057

★ ★ ★
coco_song(金币+3,VIP+0):谢谢!
可能是你的一抗浓度较高,二抗上HRP催化活力太强,同时你的显色底物处于一个临界点,反应时间不长,将周围底物催化完,形成了空白。将一抗和二抗的浓度降低,或更换新底物
6楼2008-08-22 22:00:58
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查看全部 8 个回答

conanthird

金虫 (著名写手)

★ ★
coco_song(金币+2,VIP+0):xiexie
Something wrong with the film.
I think the film has been exposure to the light.
It has nothing to do with the secondary antibodies.
You need to buy some new films and open them in the dark to avoid exposure.
Good luck.

[ Last edited by conanthird on 2008-8-21 at 20:54 ]
2楼2008-08-21 20:53:17
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beckham277

木虫 (职业作家)

你显影时估计是曝光了
3楼2008-08-22 10:18:40
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coco_song

金虫 (正式写手)

我说的背景一片黑是和膜大小的地方,没有膜的地方还是白色的呀,应该不是胶片被曝光了
4楼2008-08-22 10:33:03
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