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helenfang

铜虫 (小有名气)

[交流] 什么都回收不到是怎么回事呢,谢谢

请问各位高手:我这只克隆菜鸟,今天居然把条带给回收没了。从PCR产物中割胶回收,因是随机引物P的,有很多条带,割胶的时候要很小心,也多耽搁了些时间,但最后还是在紫外灯下确定了一下那条带还是挺亮的,用博大的回收试剂盒回收完跑完电泳居然什么都没有,各位能不能告诉可能是什么原因呢,郁闷死了,一天的实验白做了。。。
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lybio

金虫 (正式写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复,积极交流
回收产物再次PCR,产生的错配会增多。回收产物浓度低,你可以多做几管再回收。还有你问的最后一步用水的PH问题,可以不管水的PH值,直接用灭菌DDW即可。但得率是否会因此降低,这就不知道了
19楼2008-08-23 16:22:50
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
晕,回收的时候确定是按照说明书上做的?
最后洗脱的时候预热没?
2楼2008-08-21 20:57:13
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):代谢
有时候可能是回收率太低导致的……我也试过回收完什么都没有,用国产的垃圾试剂盒做的
测下OD看看到底剩下多少DNA……
3楼2008-08-22 00:19:51
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zyk_527

银虫 (小有名气)

我也遇到过这种情况,相信自己的操作继续往下做,一样也做出来了
4楼2008-08-22 08:38:41
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