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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 什么都回收不到是怎么回事呢，谢谢
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helenfang

铜虫 (小有名气)

[交流] 什么都回收不到是怎么回事呢，谢谢

请问各位高手：我这只克隆菜鸟，今天居然把条带给回收没了。从PCR产物中割胶回收，因是随机引物P的，有很多条带，割胶的时候要很小心，也多耽搁了些时间，但最后还是在紫外灯下确定了一下那条带还是挺亮的，用博大的回收试剂盒回收完跑完电泳居然什么都没有，各位能不能告诉可能是什么原因呢，郁闷死了，一天的实验白做了。。。
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1楼 2008-08-21 20:24:42
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helenfang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by snzydong at 2008-8-22 10:59:
回收胶呢有很多的原因会影响回收效率：
1.你的胶要做的厚度合适，能刚好把所有的样品都点下，有没有过多的剩余空间。
2.电泳缓冲液也要新配的，或新稀释的。
3.你初始的样品的浓度量要达到，本来就不太大的量， ...

因为条带较多，在目的条带附近就有一条，所以切胶的时间可能是多花了点时间。
我今天打算再做一次回收，用Axygen回收试剂盒再试一次，上次做其他片段回收的时候用这个用的还挺好的，那个用完了就用了这个博大的一个试用装做了，结果。。。
真的非常感谢热心帮助。
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12楼2008-08-22 14:38:21
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
晕，回收的时候确定是按照说明书上做的？
最后洗脱的时候预热没？
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2楼2008-08-21 20:57:13
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):代谢
有时候可能是回收率太低导致的……我也试过回收完什么都没有，用国产的垃圾试剂盒做的
测下OD看看到底剩下多少DNA……
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3楼2008-08-22 00:19:51
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zyk_527

银虫 (小有名气)
我也遇到过这种情况，相信自己的操作继续往下做，一样也做出来了
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4楼2008-08-22 08:38:41
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