| 查看: 1003 | 回复: 3 | ||
[求助]
T克隆连接，迟迟连接不上
|
|
小弟的载体使用自己改造过的质粒PYA4278，用AhdI酶切后露出的是T末端，载体大小为5160bp，目的片段是重叠后的产物，左臂+SPC+右臂=2568bp，使用天根的一般taq酶72℃延伸30min，16℃连接过夜，用宝生物的solutionI连接,隔天使用Ca转，所转感受态为自己制备的沙门氏菌的感受态。别人的同时做，使用同样的感受态都连接成功了，我的却迟迟连不上，不知道是什么原因，还请各位大神帮忙分析一下。 连接首先测定浓度，然后按照摩尔比1：1进行计算后添加连接，连接体系为10ul。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有14人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有8人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有13人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
lordsidious
铁杆木虫 (知名作家)
Dark Lord of the Sith
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 6617.5
- 红花: 101
- 沙发: 1
- 帖子: 9208
- 在线: 1024.3小时
- 虫号: 1196609
- 注册: 2011-01-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2016-01-09 19:18:45
周志惠
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1927.6
- 红花: 1
- 帖子: 195
- 在线: 211.4小时
- 虫号: 1781282
- 注册: 2012-04-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2017-12-22 08:26:06
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2019-01-02 22:57:57
20