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lastmonday

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[求助] 关于peg原位固化凝胶溶胀溶解的问题

我使用带两个巯基的PEG, PEG-2SH（分子量3500）和带4个丙烯酸酯基的PEG, PEG-4acr(分子量10000) 在催化剂三乙醇胺-盐酸缓冲液 TEA-Hcl（PH8.8）的条件下，完成了Michael 加成反应获得了原位固化的凝胶

$\"关于peg原位固化凝胶溶胀溶解的问题\"$
$\"关于peg原位固化凝胶溶胀溶解的问题-1\"$

凝胶固化之后，因为需要测定凝胶在人体内自然水解的时间，所以将原位固化的凝胶置于PBS溶液中（细胞培养液）并放于37℃恒温水浴箱以模仿人体内环境。
由于仪器未到，有2天之间是放于4℃的冰箱中， 2天后从冰箱中取出的时候，凝胶已经失去了原有的形态，但是在溶液中依然能辨别
之后放于37℃恒温水浴箱中，经过24h，我发现PBS溶液中的凝胶已经基本看不见了！本来预计的是经过半个月到一个月时间，凝胶缓慢水解。

所以想请问下各位大神，
1.这样的情况是否属于正常情况。凝胶是很快的溶胀溶解了吗？
2.如果我想要模拟人体内环境，将凝胶置于PBS溶液中是否有不妥之处？
3.因为做实验的时候胶凝速度比较慢，大约需要10多分钟左右。我查相关文献，凝胶的成胶时间，溶胀率，降解时间与初始浓度有关系，所以我想有没有可能是初始浓度过低造成的。
4.还想请问下增加催化剂的PH值有助于改善这种情况吗

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1楼2015-08-23 18:36:49

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引用回帖:

4楼: Originally posted by genhunter at 2015-08-24 20:20:47
估计两者配比不对，交联度不夠和单体浓度不夠。

1.溶胀属于正常情况，溶解不是
2.PBS溶液Ok
3. 可能是初始浓度过低造成的。Yes, 也可能是交联度不夠
4. 增加催化剂的PH值有助于改善这种情况吗? 难说，也许会因 ...

谢谢你的回答，我今天又重复了一次成胶实验，具体数据如下
PEG-2SH 与 PEG-4acr 按照摩尔数2:1的反应比例称取因为怀疑上一次实验的浓度偏小，所以这次实验有意增加了浓度，我分成了两组。

组1：PEG-2SH 73.5mg 溶于0.6 ml 0.04%乙酸
      PEG-4acr 105mg 溶于 0.6 ml 0.04%乙酸
      催化剂TEA-Hcl PH8.8  0.4 ml
组2：PEG-2SH 73.5mg 溶于0.75 ml 0.04%乙酸
      PEG-4acr 105mg 溶于0.75 ml 0.04%乙酸
      催化剂TEA-Hcl PH8.8  0.5 ml

增加浓度之后的胶凝速度明显加快，组1的成胶时间是1分钟，组2的成胶时间是1分40秒。组1和组2成胶之后基本没有剩余液体。随后将两组分别加入1ml的pbs溶液，置于37℃恒温水浴箱。

我详细记录了在水浴箱中凝胶的变化
组1:0-6h 基本无大改变，到第六个小时的时候凝胶内部出现一个小气泡，溶液溶胀明显，PBS液体变少，原本平齐的凝胶面变成火山口状周围突起。9h：凝胶体积明显变大，大幅度溶胀。10h：粘稠液体持续变多，凝胶持续分解，凝胶大部分已经分解。11h：凝胶基本分解完全，唯建很少量的凝胶尚存。

组2：6h：凝胶内部出现一个较大的气泡，溶液溶胀明显，PBS变少。
   9h：凝胶已经完全分解，化为粘性液体。

想请问下大神，整个实验过程中是实验方法、设计出现的问题还是这种方法所生成的凝胶无法在PBS、37℃恒温水浴的条件下长久保存？您提到过分解是不正常的情况，我觉得也是，看过一些水凝胶的文献，这种Michael加成反应所生成的凝胶所依靠的是化学键交联，凝胶本身应该会比较稳定。可是让人很郁闷的是总是不到12小时就基本分解殆尽。不知问题出在什么地方？希望阁下能赐教，万分感谢。