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lastmonday

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[求助] 关于peg原位固化凝胶溶胀溶解的问题

我使用   带两个巯基的PEG, PEG-2SH(分子量3500) 和  带4个丙烯酸酯基的PEG,  PEG-4acr(分子量10000)   在催化剂 三乙醇胺-盐酸缓冲液 TEA-Hcl(PH8.8)的条件下,完成了Michael 加成反应 获得了原位固化的凝胶


 \"关于peg原位固化凝胶溶胀溶解的问题\"
 \"关于peg原位固化凝胶溶胀溶解的问题-1\"

凝胶固化之后,因为需要测定凝胶在人体内自然水解的时间,所以将原位固化的凝胶置于PBS溶液中(细胞培养液)并放于37℃恒温水浴箱以模仿人体内环境。
由于仪器未到,有2天之间是放于4℃的冰箱中, 2天后从冰箱中取出的时候,凝胶已经失去了原有的形态,但是在溶液中依然能辨别
之后放于37℃恒温水浴箱中,经过24h,我发现PBS溶液中的凝胶已经基本看不见了!本来预计的是经过半个月到一个月时间,凝胶缓慢水解。

所以想请问下各位大神,
1.这样的情况是否属于正常情况。凝胶是很快的溶胀溶解了吗?
2.如果我想要模拟人体内环境,将凝胶置于PBS溶液中是否有不妥之处?
3.因为做实验的时候胶凝速度比较慢,大约需要10多分钟左右。我查相关文献,凝胶的成胶时间,溶胀率,降解时间与初始浓度有关系,所以我想有没有可能是初始浓度过低造成的。
4.还想请问下增加催化剂的PH值有助于改善这种情况吗
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
原位凝胶系统在可注射缓释制剂中的研究进展
http://www.doc88.com/p-6458127920204.html
2楼2015-08-23 18:57:41
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lastmonday

捐助贵宾 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2015-08-23 18:57:41
原位凝胶系统在可注射缓释制剂中的研究进展
http://www.doc88.com/p-6458127920204.html

谢谢回答
3楼2015-08-24 16:23:04
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
估计两者配比不对,交联度不夠和单体浓度不夠。

1.溶胀属于正常情况,溶解不是
2.PBS溶液Ok
3. 可能是初始浓度过低造成的。Yes, 也可能是交联度不夠
4. 增加催化剂的PH值有助于改善这种情况吗? 难说,也许会因为增加脂键水解而加速溶解

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离成功还差一点
4楼2015-08-24 20:20:47
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lastmonday

捐助贵宾 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by genhunter at 2015-08-24 20:20:47
估计两者配比不对,交联度不夠和单体浓度不夠。

1.溶胀属于正常情况,溶解不是
2.PBS溶液Ok
3. 可能是初始浓度过低造成的。Yes, 也可能是交联度不夠
4. 增加催化剂的PH值有助于改善这种情况吗? 难说,也许会因 ...

谢谢你的回答,我今天又重复了一次成胶实验,具体数据如下
PEG-2SH 与 PEG-4acr 按照摩尔数2:1的反应比例 称取 因为怀疑上一次实验的浓度偏小,所以这次实验有意增加了浓度,我分成了两组。

组1:PEG-2SH 73.5mg 溶于0.6 ml 0.04%乙酸
        PEG-4acr 105mg 溶于 0.6 ml 0.04%乙酸
        催化剂TEA-Hcl PH8.8  0.4 ml
组2:PEG-2SH 73.5mg 溶于0.75 ml 0.04%乙酸
         PEG-4acr 105mg 溶于0.75 ml 0.04%乙酸
         催化剂TEA-Hcl PH8.8  0.5 ml

增加浓度之后的胶凝速度明显加快,组1的成胶时间是1分钟,组2的成胶时间是1分40秒。组1和组2成胶之后基本没有剩余液体。随后将两组分别加入1ml的pbs溶液,置于37℃恒温水浴箱。

我详细记录了在水浴箱中凝胶的变化
组1:0-6h 基本无大改变,到第六个小时的时候凝胶内部出现一个小气泡,溶液溶胀明显,PBS液体变少,原本平齐的凝胶面变成火山口状周围突起。9h:凝胶体积明显变大,大幅度溶胀 。10h:粘稠液体持续变多,凝胶持续分解,凝胶大部分已经分解。11h:凝胶基本分解完全,唯建很少量的凝胶尚存。

组2:6h:凝胶内部出现一个较大的气泡,溶液溶胀明显,PBS变少。
       9h:凝胶已经完全分解,化为粘性液体。

想请问下大神,整个实验过程中是实验方法、设计出现的问题还是这种方法所生成的凝胶无法在PBS、37℃恒温水浴的条件下长久保存?您提到过分解是不正常的情况,我觉得也是,看过一些水凝胶的文献,这种Michael加成反应所生成的凝胶所依靠的是化学键交联,凝胶本身应该会比较稳定。可是让人很郁闷的是总是不到12小时就基本分解殆尽。不知问题出在什么地方?希望阁下能赐教,万分感谢。
5楼2015-08-28 05:12:22
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lastmonday at 2015-08-28 05:12:22
谢谢你的回答,我今天又重复了一次成胶实验,具体数据如下
PEG-2SH 与 PEG-4acr 按照摩尔数2:1的反应比例 称取 因为怀疑上一次实验的浓度偏小,所以这次实验有意增加了浓度,我分成了两组。

组1:PEG-2SH 73.5 ...

最终pH是多少? 怀疑是偏离中性条件下有些分子内脂键水解了。
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6楼2015-08-28 12:41:57
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lastmonday

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引用回帖:
6楼: Originally posted by genhunter at 2015-08-28 12:41:57
最终pH是多少? 怀疑是偏离中性条件下有些分子内脂键水解了。...

我这周重新做了凝胶,凝胶的生成条件是:37℃水浴,催化剂ph值是8.0,反应物浓度较以前有所增加。这次胶凝的时间大概是3分钟,成胶之后感觉胶体比原来结构坚韧,之后加入1mlPBS置于37℃水浴中,这次凝胶的稳定时间比以前有所增加,到了48小时,在第二天上午的时候我注意到凝胶结构已经变得有点脆弱,以为是吸水溶胀的原因,因为我所加的PBS已经被凝胶所完全吸收,所以我又加了1ml的PBS,但是到下午时凝胶已经逐渐变成半固态,结构崩解。
我感觉凝胶的分解并不是一点一点的分解,而是到达某一个临界值之后,整个结构都会崩解。
7楼2015-09-05 23:22:11
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lastmonday at 2015-09-05 23:22:11
我这周重新做了凝胶,凝胶的生成条件是:37℃水浴,催化剂ph值是8.0,反应物浓度较以前有所增加。这次胶凝的时间大概是3分钟,成胶之后感觉胶体比原来结构坚韧,之后加入1mlPBS置于37℃水浴中,这次凝胶的稳定时间 ...

4度下还是室温下存放的?放了防腐剂没?测下产物pH, 脂链水解后会变酸。
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8楼2015-09-06 08:32:53
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gemini_guo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lastmonday at 2015-08-28 05:12:22
谢谢你的回答,我今天又重复了一次成胶实验,具体数据如下
PEG-2SH 与 PEG-4acr 按照摩尔数2:1的反应比例 称取 因为怀疑上一次实验的浓度偏小,所以这次实验有意增加了浓度,我分成了两组。

组1:PEG-2SH 73.5 ...

你好,我现在刚开始做凝胶的实验,也遇到了相似的问题,现在你应该已经混成大神了吧,可不可以请教请教
9楼2016-10-10 22:50:19
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gemini_guo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by genhunter at 2015-09-06 08:32:53
4度下还是室温下存放的?放了防腐剂没?测下产物pH, 脂链水解后会变酸。...

想问下亲是不是做水凝胶方向的,我这一个医学生,现在转做水凝胶了,组里前后都没人做这方向的,可不可以咨询下你,救命哒~
10楼2016-10-10 23:07:24
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