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求助：测蛋白含量时发现基因工程菌无法破壁
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我用的是工程菌BL21（DE3），主要是做蛋白表达。用考马斯亮蓝法测蛋白含量时发现无法破壁，我用的破壁方法是，煮沸裂解法和液氮冻融法，没有加裂解液。 需要说明的一点是：我用的这个菌是第三次转化的了。之前第一次转化的菌非常好破壁。蛋白表达量下降后，重新提质粒再转化后，菌的细胞壁就不好破了。我现在做这个已经是第三次提质粒，再转化到宿主菌了，最近几天一直在做破壁，发现就是破不了，不知道是什么原因，有什么好的办法吗？还请各位帮帮我。 |
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4楼2008-08-20 23:51:09
