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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助qPCR扩增效率高的原因
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助qPCR扩增效率高的原因 已有2人参与

各位大神，我用qPCR做相对定量，做标准曲线的时候出现扩增效率高的问题，请问我可以做哪些改进呢？跪谢
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1楼 2015-08-19 17:11:42
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许彦

木虫 (正式写手)
标准曲线是不是自己稀释的，没有稀释好？

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2楼2015-08-20 07:22:04
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)
你是说模版的稀释吗，是自己稀释的，只是模版稀释的问题吗？

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3楼2015-08-20 08:36:49
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vege的桌子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
斜率跟相关系数没有达标
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4楼2015-08-20 12:07:44
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sskyy

新虫 (初入文坛)
路过

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5楼2015-08-20 12:19:04
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不吃饭lovef

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-20 23:34:19
首先把模板稀释好，相关系数到0.98以上，再看效率！效率高改进的方法是优化的退火温度，和合适的引物浓度，可以少加点引物！

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6楼2015-08-20 14:26:13
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许彦

木虫 (正式写手)
不好说具体问题，稀释可能是一个问题。

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7楼2015-08-20 14:27:51
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ljq1027

金虫 (小有名气)
溶解曲线的图是什么样子的？
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无可奈何花落去，似曾相识燕归来~
8楼2015-08-20 15:45:12
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ljq1027 at 2015-08-20 15:45:12
溶解曲线的图是什么样子的？

溶解曲线应该是没有问题的，单峰型，也没有其它的杂峰。

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9楼2015-08-21 09:56:56
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 不吃饭lovef at 2015-08-20 14:26:13
首先把模板稀释好，相关系数到0.98以上，再看效率！效率高改进的方法是优化的退火温度，和合适的引物浓度，可以少加点引物！

谢谢。

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10楼2015-08-21 09:58:29
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