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求助qPCR扩增效率高的原因
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zhou阳阳
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求助qPCR扩增效率高的原因
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各位大神,我用qPCR做相对定量,做标准曲线的时候出现扩增效率高的问题,请问我可以做哪些改进呢?跪谢
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1楼
2015-08-19 17:11:42
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许彦
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标准曲线是不是自己稀释的,没有稀释好?
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2楼
2015-08-20 07:22:04
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zhou阳阳
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你是说模版的稀释吗,是自己稀释的,只是模版稀释的问题吗?
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3楼
2015-08-20 08:36:49
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专业: 生物大分子结构与功能
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斜率跟相关系数没有达标
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2015-08-20 12:07:44
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专业: 兽医免疫学
路过
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2015-08-20 12:19:04
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不吃饭lovef
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2015-08-20 23:34:19
首先把模板稀释好,相关系数到0.98以上,再看效率!效率高改进的方法是优化的退火温度,和合适的引物浓度,可以少加点引物!
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6楼
2015-08-20 14:26:13
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许彦
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专业: 生物技术药物
不好说具体问题,稀释可能是一个问题。
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7楼
2015-08-20 14:27:51
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ljq1027
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溶解曲线的图是什么样子的?
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无可奈何花落去,似曾相识燕归来~
8楼
2015-08-20 15:45:12
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zhou阳阳
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8楼
:
Originally posted by
ljq1027
at 2015-08-20 15:45:12
溶解曲线的图是什么样子的?
溶解曲线应该是没有问题的,单峰型,也没有其它的杂峰。
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9楼
2015-08-21 09:56:56
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zhou阳阳
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6楼
:
Originally posted by
不吃饭lovef
at 2015-08-20 14:26:13
首先把模板稀释好,相关系数到0.98以上,再看效率!效率高改进的方法是优化的退火温度,和合适的引物浓度,可以少加点引物!
谢谢。
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10楼
2015-08-21 09:58:29
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