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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助qPCR扩增效率高的原因 已有2人参与

各位大神,我用qPCR做相对定量,做标准曲线的时候出现扩增效率高的问题,请问我可以做哪些改进呢?跪谢
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许彦

木虫 (正式写手)

标准曲线是不是自己稀释的,没有稀释好?

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2楼2015-08-20 07:22:04
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)

你是说模版的稀释吗,是自己稀释的,只是模版稀释的问题吗?

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3楼2015-08-20 08:36:49
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vege的桌子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
斜率跟相关系数没有达标
4楼2015-08-20 12:07:44
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sskyy

新虫 (初入文坛)

路过

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5楼2015-08-20 12:19:04
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不吃饭lovef

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-20 23:34:19
首先把模板稀释好,相关系数到0.98以上,再看效率!效率高改进的方法是优化的退火温度,和合适的引物浓度,可以少加点引物!

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6楼2015-08-20 14:26:13
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许彦

木虫 (正式写手)

不好说具体问题,稀释可能是一个问题。

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7楼2015-08-20 14:27:51
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ljq1027

金虫 (小有名气)

溶解曲线的图是什么样子的?
无可奈何花落去,似曾相识燕归来~
8楼2015-08-20 15:45:12
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by ljq1027 at 2015-08-20 15:45:12
溶解曲线的图是什么样子的?

溶解曲线应该是没有问题的,单峰型,也没有其它的杂峰。

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9楼2015-08-21 09:56:56
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 不吃饭lovef at 2015-08-20 14:26:13
首先把模板稀释好,相关系数到0.98以上,再看效率!效率高改进的方法是优化的退火温度,和合适的引物浓度,可以少加点引物!

谢谢。

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10楼2015-08-21 09:58:29
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