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请教：酵母菌落PCR的问题？
请教：酵母菌落PCR的问题？
我采用的方法是：用牙签挑取一定量的菌落，使其溶于10微升水中，-70度反复冻融三次，离心取上清1微升作为模板进行PCR。
但现在的问题是PCR的结果相当的不稳定，也就是说，在使用相同的模板的条件下，PCR的结果都很不一致，有时有PCR产物（通过电泳来看，扩增效果还可以），有时没有。重复性不高。
PS：应该不是操作方面的问题，我已经重复过很多遍了。
所以，想请教一下高手们，是哪里出了问题？
谢谢！ |
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