24小时热门版块排行榜    

查看: 1212  |  回复: 14
当前主题已经存档。

zhangjie1984

铜虫 (初入文坛)

[交流] 请教:酵母菌落PCR的问题?

请教:酵母菌落PCR的问题?
      我采用的方法是:用牙签挑取一定量的菌落,使其溶于10微升水中,-70度反复冻融三次,离心取上清1微升作为模板进行PCR。
      但现在的问题是PCR的结果相当的不稳定,也就是说,在使用相同的模板的条件下,PCR的结果都很不一致,有时有PCR产物(通过电泳来看,扩增效果还可以),有时没有。重复性不高。
PS:应该不是操作方面的问题,我已经重复过很多遍了。
      所以,想请教一下高手们,是哪里出了问题?
      谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)


xyklmu(金币+1,VIP+0):感谢答复
我觉得是反复冻融破菌效果不稳定导致的,我记得我原来是90度水浴10min来破菌的,你试试看
2楼2008-08-19 17:05:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laihx38j

禁虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
本帖内容被屏蔽

3楼2008-08-19 17:25:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjie1984

铜虫 (初入文坛)

好的,谢谢!
我先试一下看。
4楼2008-08-19 20:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyixst

木虫 (正式写手)

100度水浴10min来破菌吧
5楼2008-08-20 08:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolong1984

银虫 (小有名气)

我们用的是2楼的方法!
6楼2008-08-20 08:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyk_527

银虫 (小有名气)

酵母菌落PCR我也总是做不好
7楼2008-08-20 09:19:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

康成老陈

没做过,纯支持.
8楼2008-08-20 09:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 7-21 20:02
不用冻 你就直接加到你的pcr反应液中 我做过没有问题
9楼2008-08-22 11:14:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

micro6790

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我现在做的的是酿酒酵母的PCR,用蜗牛酶37度消化一个小时,也是做不出来。
现在要扩的片段比较大,2.3Kb。不知道楼主能给什么意见
10楼2009-07-21 09:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhangjie1984 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +4 南迦720 2026-02-28 4/200 2026-02-28 16:31 by etapple
[考研] 0856材料求调剂 +8 hyf hyf hyf 2026-02-28 9/450 2026-02-28 16:27 by etapple
[考研] 285求调剂 +3 满头大汗的学生 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:22 by 无际的草原
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 312求调剂 +4 吃宵夜1 2026-02-28 5/250 2026-02-28 16:11 by gjm133
[考博] 26申博 +3 想申博! 2026-02-26 3/150 2026-02-28 16:07 by nxgogo
[考研] 材料类求调剂 +3 wana_kiko 2026-02-28 3/150 2026-02-28 15:03 by lature00
[考研] 295求调剂 +4 19171856320 2026-02-28 4/200 2026-02-28 13:39 by ms629
[考研] 290求调剂 +4 材料专硕调剂; 2026-02-28 5/250 2026-02-28 13:32 by houyaoxu
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[考研] 280求调剂 +6 Qq206./ 2026-02-21 6/300 2026-02-28 11:20 by 我!要一战成硕
[考博] 博士推荐 +3 花儿笑? 2026-02-21 4/200 2026-02-27 18:30 by 黑!在干嘛
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 10/500 2026-02-27 13:22 by ichall
[基金申请] 什么是人一生最重要的? +10 瞬息宇宙 2026-02-21 10/500 2026-02-27 08:46 by tfang
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[教师之家] 版面费该交吗 +14 苹果在哪里 2026-02-22 17/850 2026-02-26 11:55 by AGI智创机器人
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见