应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：酵母菌落PCR的问题？
151/2返回列表12下一页
查看: 1266  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zhangjie1984

铜虫 (初入文坛)

[交流] 请教：酵母菌落PCR的问题？

请教：酵母菌落PCR的问题？
      我采用的方法是：用牙签挑取一定量的菌落，使其溶于10微升水中，-70度反复冻融三次，离心取上清1微升作为模板进行PCR。
      但现在的问题是PCR的结果相当的不稳定，也就是说，在使用相同的模板的条件下，PCR的结果都很不一致，有时有PCR产物（通过电泳来看，扩增效果还可以），有时没有。重复性不高。
PS：应该不是操作方面的问题，我已经重复过很多遍了。
      所以，想请教一下高手们，是哪里出了问题？
      谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-08-19 16:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
★
xyklmu(金币+1,VIP+0):感谢答复
我觉得是反复冻融破菌效果不稳定导致的，我记得我原来是90度水浴10min来破菌的，你试试看
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-08-19 17:05:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laihx38j

禁虫 (职业作家)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
本帖内容被屏蔽
3楼2008-08-19 17:25:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjie1984

铜虫 (初入文坛)
好的，谢谢！
我先试一下看。
赞一下 回复此楼
4楼2008-08-19 20:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyixst

木虫 (正式写手)
100度水浴10min来破菌吧
赞一下 回复此楼
5楼2008-08-20 08:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolong1984

银虫 (小有名气)
我们用的是2楼的方法！
赞一下 回复此楼
6楼2008-08-20 08:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyk_527

银虫 (小有名气)
酵母菌落PCR我也总是做不好
赞一下 回复此楼
7楼2008-08-20 09:19:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

康成老陈

没做过,纯支持.
回复此楼
8楼2008-08-20 09:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 7-21 20:02
不用冻 你就直接加到你的pcr反应液中 我做过没有问题
赞一下(10人) 回复此楼
9楼2008-08-22 11:14:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

micro6790

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我现在做的的是酿酒酵母的PCR，用蜗牛酶37度消化一个小时，也是做不出来。
现在要扩的片段比较大，2.3Kb。不知道楼主能给什么意见
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-07-21 09:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhangjie1984 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 340求调剂 +4 话梅糖111 2026-03-24 4/200 2026-03-24 21:41 by yuyu98412
[考研] 0854电子信息求调剂 +6 α____ 2026-03-22 7/350 2026-03-24 19:46 by sunjie8888
[考研] 收08调剂生 +6 komorebi69 2026-03-18 6/300 2026-03-24 19:09 by 汪！？！
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +11 hanamiko 2026-03-18 11/550 2026-03-23 23:12 by peike
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 0703化学求调剂 +4 奶油草莓. 2026-03-22 5/250 2026-03-23 19:37 by pswait
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 求调剂材料学硕080500，总分289分 5+3 @taotao 2026-03-19 21/1050 2026-03-23 10:17 by 冠c哥
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭