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依梵1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 分光光度计偏差问题 已有4人参与

各位大神,求助一个关于分光光度计的问题。实验室有两台分光光度计,测定同一份菌悬液样品的时候,使用580nm,一个测定值为0.381,一个测定值为0.563;但是测定同一份重铬酸钾溶液时,使用475nm,两台仪器的测定值几乎相同,这是什么原因呢?
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依梵1988

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 3306549 at 2015-08-16 10:24:25
= =||
那是不是比色皿的问题?好比一个玻璃一个石英?最好也别用狭缝
分光光度计的差异也有可能,不过应该不是这个
温度和培养时间?或者你取样的时候有没有摇匀?...

比色皿是一样的,两个,一个空白一个样品,在1号仪器上测完,然后用2号仪器测,然后再改变波长,换样品,再在1号仪器上测完,然后用2号仪器测。菌悬液的测定值相差很大,重铬酸钾溶液的测定值几乎一样。愁人啊……
11楼2015-08-17 07:52:36
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左岸Mercy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果确定样品是同一样品,且在同样时间和条件下用不同仪器测的话,结果不同,就能肯定是仪器问题。先排查是不是使用不当,没有校零点扣空白,或其他操作不当,再看看是不是灯出了问题,用不同虑光片试,常用波长都检一遍,有问题找厂家修

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破茧成蝶时,沧海任我飞
2楼2015-08-14 15:33:06
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左岸Mercy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有是不是你的菌液不均匀,局部浓度不一样,而重铬酸钾是很均匀分散的溶液

[ 发自小木虫客户端 ]
破茧成蝶时,沧海任我飞
3楼2015-08-14 15:37:59
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gaochengguo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用全波长扫描,确定菌悬液的最大吸收的波长。
如今的痛苦终会成为以后的财富
4楼2015-08-14 16:43:11
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