24小时热门版块排行榜    

查看: 1154  |  回复: 9

voefeifei

铁虫 (初入文坛)

[求助] Qpcr 溶解曲线好诡异 已有2人参与

首先说下我p的模板用的是CDNA,产物应该是150~200bp, p了20多个,10多个是正常的溶解曲线,还有一些是不正常的,然后p完之后溶解曲线如下

Qpcr  溶解曲线好诡异
]{[3QGOJCNN31EZ{SH8O{JT.png


Qpcr  溶解曲线好诡异-1
5PHY2TO8731@(W7(HUK3[4L.png


Qpcr  溶解曲线好诡异-2
IJY9J50_P5BW2D%L6[W6}C6.png
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voefeifei

铁虫 (初入文坛)

大家给个建议和意见啊 ,我需要你们啊 自顶!!!
2楼2015-08-10 20:02:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinxuan0904

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
voefeifei: 金币+2, ★★★★★最佳答案, 没有什么金币,但是还要意思下的, 2015-08-11 14:19:38
引物不行吧!你做把普通PCR看看,是不是有非特异性扩增啊!
3楼2015-08-11 09:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voefeifei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jinxuan0904 at 2015-08-11 09:47:21
引物不行吧!你做把普通PCR看看,是不是有非特异性扩增啊!

qpcr的结果取了1ul然后普通pcr了下,跑了下电泳图
Qpcr  溶解曲线好诡异-3
P50811-141824.jpg

4楼2015-08-11 14:23:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinxuan0904

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by voefeifei at 2015-08-11 14:23:46
qpcr的结果取了1ul然后普通pcr了下,跑了下电泳图

P50811-141824.jpg
...

怎么都是弥散啊!引物不行吧!
5楼2015-08-11 14:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voefeifei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jinxuan0904 at 2015-08-11 14:25:03
怎么都是弥散啊!引物不行吧!...

但是有几个据说是以前有人文章里发过可以p出来但是引物是我们自己设计的,最后个是actin  可以p出来
6楼2015-08-11 14:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinxuan0904

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by voefeifei at 2015-08-11 14:29:06
但是有几个据说是以前有人文章里发过可以p出来但是引物是我们自己设计的,最后个是actin  可以p出来...

以前文章的引物不能用啊,不同的体系,不同的条件,不同的仪器,不同的厂家合成的引物,这么多不定的因素,怎么能用呢?
7楼2015-08-11 14:31:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voefeifei

铁虫 (初入文坛)

8楼2015-08-12 09:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

i65536

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这些扩不出来的cDNA其它引物能扩得出来么?如果其它引物的话建议重新设计下引物,可能是特异性不够好
我为何这么傻?
9楼2015-08-14 10:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voefeifei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by i65536 at 2015-08-14 10:49:10
这些扩不出来的cDNA其它引物能扩得出来么?如果其它引物的话建议重新设计下引物,可能是特异性不够好

可以扩出  actin      其他的能扩出几个来但非常浅的条带
10楼2015-08-18 17:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 voefeifei 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:27 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +5 布布和一二 2026-08-08 8/400 2026-08-08 14:54 by archvillain
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +11 且听虎啸 2026-08-07 14/700 2026-08-08 12:50 by 布布和一二
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
信息提示
请填处理意见