应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒？
111/2返回列表12下一页
查看: 3245  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zj251989

新虫 (小有名气)

[求助] 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒？ 已有2人参与

大家早上好：
         实验处处是问题啊！！！最近电转化革兰氏阳性菌，无法提取重组质粒来验证和检验，哪位大神知道如何提取革兰氏阳性菌重组质粒的方法？

我前几天加了溶菌酶，基本没有什么效果。。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-10 08:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zj251989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liygmail at 2015-08-10 12:47:07
先用溶菌酶破壁处理，
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可

我用溶菌酶破不了壁，时间从几小时到几天都有，还是无法破壁
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-08-11 14:21:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
好提啊，我们经常提

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-10 08:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zj251989: 金币+2, ★有帮助 2015-08-11 14:20:48
先用溶菌酶破壁处理，
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-10 12:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zj251989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2015-08-10 08:29:40
好提啊，我们经常提

你们是用试剂盒提的吗?
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-11 14:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by zj251989 at 2015-08-11 14:21:48
我用溶菌酶破不了壁，时间从几小时到几天都有，还是无法破壁...

溶菌酶如果没有变质失效，30分钟-2小时37度水浴应该就能处理好，
还有，要注意溶菌酶不宜反复冻融，最好现用现配，用TE溶解。
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-11 20:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyongliangx

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liygmail at 2015-08-11 20:45:34
溶菌酶如果没有变质失效，30分钟-2小时37度水浴应该就能处理好，
还有，要注意溶菌酶不宜反复冻融，最好现用现配，用TE溶解。...

问下，加入重悬溶液 250ul之后，我应该加入多少体积的溶菌酶？一般配溶菌酶时浓度应该多少？
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-20 13:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计你的宿主菌用的代数太多了，做感受态要用最原始的菌株，提出来的质粒跑胶拖尾现象严重，甚至看不到质粒带，就是一片，但应该可以做PCR鉴定   溶菌酶在加solutionI时一起加入就行，固体液体都可以，固体的加火柴头大小就可以了很省事
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-20 15:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

远飞的鸟儿

新虫 (初入文坛)
您好  请问您做革兰氏阳性菌电转化的体系是什么呀  我最近在做芽孢杆菌的电转化  怎么也转不成功？
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-05 15:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxinjin

银虫 (知名作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2015-08-10 08:29:40
好提啊，我们经常提

你好前辈，请问你怎么提的
赞一下 回复此楼
10楼2019-07-02 18:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zj251989 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭