应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒？
汕头大学海洋科学接受调剂
111/2返回列表12下一页
查看: 3082  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zj251989

新虫 (小有名气)

[求助] 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒？ 已有2人参与

大家早上好：
         实验处处是问题啊！！！最近电转化革兰氏阳性菌，无法提取重组质粒来验证和检验，哪位大神知道如何提取革兰氏阳性菌重组质粒的方法？

我前几天加了溶菌酶，基本没有什么效果。。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-10 08:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zj251989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liygmail at 2015-08-10 12:47:07
先用溶菌酶破壁处理，
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可

我用溶菌酶破不了壁，时间从几小时到几天都有，还是无法破壁
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-08-11 14:21:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
好提啊，我们经常提

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-10 08:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zj251989: 金币+2, ★有帮助 2015-08-11 14:20:48
先用溶菌酶破壁处理，
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-10 12:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zj251989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2015-08-10 08:29:40
好提啊，我们经常提

你们是用试剂盒提的吗?
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-11 14:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by zj251989 at 2015-08-11 14:21:48
我用溶菌酶破不了壁，时间从几小时到几天都有，还是无法破壁...

溶菌酶如果没有变质失效，30分钟-2小时37度水浴应该就能处理好，
还有，要注意溶菌酶不宜反复冻融，最好现用现配，用TE溶解。
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-11 20:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyongliangx

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liygmail at 2015-08-11 20:45:34
溶菌酶如果没有变质失效，30分钟-2小时37度水浴应该就能处理好，
还有，要注意溶菌酶不宜反复冻融，最好现用现配，用TE溶解。...

问下，加入重悬溶液 250ul之后，我应该加入多少体积的溶菌酶？一般配溶菌酶时浓度应该多少？
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-20 13:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计你的宿主菌用的代数太多了，做感受态要用最原始的菌株，提出来的质粒跑胶拖尾现象严重，甚至看不到质粒带，就是一片，但应该可以做PCR鉴定   溶菌酶在加solutionI时一起加入就行，固体液体都可以，固体的加火柴头大小就可以了很省事
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-20 15:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

远飞的鸟儿

新虫 (初入文坛)
您好  请问您做革兰氏阳性菌电转化的体系是什么呀  我最近在做芽孢杆菌的电转化  怎么也转不成功？
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-05 15:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxinjin

银虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2015-08-10 08:29:40
好提啊，我们经常提

你好前辈，请问你怎么提的
赞一下 回复此楼
10楼2019-07-02 18:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zj251989 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-11 13/650 2026-04-14 19:18 by Art1977
[考研] 327求调剂 +23 Xxjc1107. 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 18:48 by 逍遥三郎
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 材料类284调剂 +41 想换手机不想解� 2026-04-08 49/2450 2026-04-14 17:53 by lhj2009
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +26 土豆er? 2026-04-09 29/1450 2026-04-13 15:15 by 独醉梦孤城
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 。 +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +12 小熊睿睿_s 2026-04-11 16/800 2026-04-12 16:28 by 钰璞
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 计算机类求调剂，22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭