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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒？
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zj251989

新虫 (小有名气)

[求助] 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒？ 已有2人参与

大家早上好：
         实验处处是问题啊！！！最近电转化革兰氏阳性菌，无法提取重组质粒来验证和检验，哪位大神知道如何提取革兰氏阳性菌重组质粒的方法？

我前几天加了溶菌酶，基本没有什么效果。。。。。。
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1楼 2015-08-10 08:12:01
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计你的宿主菌用的代数太多了，做感受态要用最原始的菌株，提出来的质粒跑胶拖尾现象严重，甚至看不到质粒带，就是一片，但应该可以做PCR鉴定   溶菌酶在加solutionI时一起加入就行，固体液体都可以，固体的加火柴头大小就可以了很省事
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8楼2015-08-20 15:59:57
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
好提啊，我们经常提

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-08-10 08:29:40
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zj251989: 金币+2, ★有帮助 2015-08-11 14:20:48
先用溶菌酶破壁处理，
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可
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3楼2015-08-10 12:47:07
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zj251989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liygmail at 2015-08-10 12:47:07
先用溶菌酶破壁处理，
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可

我用溶菌酶破不了壁，时间从几小时到几天都有，还是无法破壁
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4楼2015-08-11 14:21:48
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