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zj251989

新虫 (小有名气)

[求助] 如何提取革兰氏阳性菌导入的重组质粒? 已有2人参与

大家早上好:
         实验处处是问题啊!!!最近电转化革兰氏阳性菌,无法提取重组质粒来验证和检验,哪位大神知道如何提取革兰氏阳性菌重组质粒的方法?

我前几天加了溶菌酶,基本没有什么效果。。。。。。
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计你的宿主菌用的代数太多了,做感受态要用最原始的菌株,提出来的质粒跑胶拖尾现象严重,甚至看不到质粒带,就是一片,但应该可以做PCR鉴定   溶菌酶在加solutionI时一起加入就行,固体液体都可以,固体的加火柴头大小就可以了很省事
8楼2015-08-20 15:59:57
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查看全部 11 个回答

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
好提啊,我们经常提

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-10 08:29:40
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zj251989: 金币+2, 有帮助 2015-08-11 14:20:48
先用溶菌酶破壁处理,
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可
3楼2015-08-10 12:47:07
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zj251989

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liygmail at 2015-08-10 12:47:07
先用溶菌酶破壁处理,
后续操作按照大肠杆菌质粒提取即可

我用溶菌酶破不了壁,时间从几小时到几天都有,还是无法破壁
4楼2015-08-11 14:21:48
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