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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助有关线粒体的问题
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panshuqin

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助有关线粒体的问题 已有2人参与

求助：有没有测定过组织线粒体中的ROS和蛋白浓度的呢？目前准备测定组织线粒体中的ROS和蛋白浓度，是不是直接拿试剂盒来提取线粒体，然后用裂解液来裂解线粒体，测定裂解液中的ROS和蛋白浓度   请各位大仙多多指教！！！！
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多多指教
1楼 2015-08-09 21:50:33
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
顺序反了吧，应该是现测蛋白浓度，然后测ROS吧。我没测过ROS还，但感觉是先测蛋白浓度
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panshuqin
2楼2015-08-10 13:42:13
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panshuqin

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ericyo918 at 2015-08-10 13:42:13
顺序反了吧，应该是现测蛋白浓度，然后测ROS吧。我没测过ROS还，但感觉是先测蛋白浓度

个人觉得没有什么影响吧！弱弱地问一句：您有测过线粒体中的其它指标（比如NO，过氧化氢等）吗？
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多多指教
3楼2015-08-10 15:22:05
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by panshuqin at 2015-08-10 16:22:05
个人觉得没有什么影响吧！弱弱地问一句：您有测过线粒体中的其它指标（比如NO，过氧化氢等）吗？...

这个还没有。我觉得先统一线粒体量，测出来的才精确吧。我测过线粒体活性和线粒体蛋白的表达，那些指标还没搞过，不过会搞得。应该会有相关试剂盒测吧。
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4楼2015-08-10 15:49:18
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twtanaps

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ericyo918 at 2015-08-10 15:49:18
这个还没有。我觉得先统一线粒体量，测出来的才精确吧。我测过线粒体活性和线粒体蛋白的表达，那些指标还没搞过，不过会搞得。应该会有相关试剂盒测吧。...

你好！请问线粒体提出来后可以冻起来，再测活性吗？还有膜电位，膜流动性，细胞色素？谢谢
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5楼2015-10-13 00:24:48
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

可以，不过要-80保存

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6楼2015-10-13 00:33:38
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陈陈陈123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ericyo918 at 2015-10-13 00:33:38
可以，不过要-80保存

想请教您一个问题，我想测定组织中线粒体的酶活性，需要用试剂盒提取线粒体么？还是直接将组织制成线粒体蛋白悬液？刚刚开始实验，很多不明白，请教一下，谢谢。
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7楼2015-11-27 15:47:34
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 陈陈陈123 at 2015-11-27 16:47:34
想请教您一个问题，我想测定组织中线粒体的酶活性，需要用试剂盒提取线粒体么？还是直接将组织制成线粒体蛋白悬液？刚刚开始实验，很多不明白，请教一下，谢谢。...

最好是把线粒体提出来测复合物酶活，我没做过全蛋白测酶活的，有些文献里也有这样做的

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8楼2015-11-28 00:44:47
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陈陈陈123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ericyo918 at 2015-11-28 00:44:47
最好是把线粒体提出来测复合物酶活，我没做过全蛋白测酶活的，有些文献里也有这样做的
...

还想请教一下，我看一般提取线粒体都需要超声波破碎，有没有其他方法可以替代呢？

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9楼2015-11-28 15:48:50
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 陈陈陈123 at 2015-11-28 16:48:50
还想请教一下，我看一般提取线粒体都需要超声波破碎，有没有其他方法可以替代呢？
...

超声是破坏线粒体膜吧，线粒体膜inside out，应该是在提取玩线粒体以后吧，这步不能省。要不打死也做不出来，提线粒体是蔗糖梯度法提，不需要超声吧
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10楼2015-11-29 13:19:27
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