应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：RT-PCR的条带跑不开是什么原因？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 849  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

deity214

铁虫 (小有名气)

[交流] 请教：RT-PCR的条带跑不开是什么原因？

RT-PCR的条带跑不开是什么原因？

1.2%的琼脂糖凝胶
目的条带514bp
[search]RT-PCR[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:13 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-08-15 13:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deity214

铁虫 (小有名气)
请大家分析一下这张电泳图可能出问题的地方

目的条带是扩增出来了，可是图太难看了，怎样改善一下？

1、为何每个条带都是两边浓，中间淡？
2、marker量我是加了2ul，有点淡
3、目的条带514bp，用多少的marker合适?我左边的是100bp ladder，右边是50bp ladder

谢了先！
赞一下 回复此楼
2楼2008-08-15 13:15:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
这个条带的分离还可以啦~~你要想跑开一点就胶做浓一点
染料加得不够就条带很淡，或者是胶太烫就加了染料分解了，要不然就是暴光参数没设好
问题1、上样没上好，分布不均匀~~~梳子太宽了，建议用薄梳子。要不然，上样的时候就小心一点，均匀地往孔里头加。
2、一般我都用5ul
3、100bp可以了~~~反正又500和514在这么稀的胶其实是差不多的
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-08-15 14:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deity214

铁虫 (小有名气)
多谢多谢，回去再跑跑试试
赞一下 回复此楼
4楼2008-08-15 16:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deity214

铁虫 (小有名气)
染料加得不够就条带很淡，或者是胶太烫就加了染料分解了，要不然就是暴光参数没设好

溴化乙靛是5%的，曝光参数怎么设？

我这里是300nm紫外线灯看
赞一下 回复此楼
5楼2008-08-15 16:20:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):感谢答复，积极交流
5%？
预染的话，貌似是1：20000的体积加原液……貌似而已，具体忘记了
后染的话，我没有明确计算过，反正加到TBE或者TAE里头，看到溶液有点发红就可以了，然后染5min，漂洗5min

曝光参数其实我说的是对比度、曝光时间、增益等~~
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2008-08-15 20:04:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

figo.339

木虫 (著名写手)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复，积极交流
6ul mark
用1.2%的胶可以，但是要多跑一段时间，你换换梳子试试，用窄的梳子
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2008-08-15 23:46:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiexinyao

银虫 (小有名气)

呵呵

可以试着把电压调低些看看
赞一下 回复此楼
8楼2008-09-04 15:24:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longxiange520

金虫 (小有名气)
条代淡主要可能和染料有关的，有时要是感觉太淡了，可以直接再染色一下吧，我一般１００毫升的胶加１微升的ＥＢ好像就可以了．
样加的少的话最好用小孔大梳子．
ＭＡＲＫＥＲ我一般是加５微升，效果好像还不错
赞一下 回复此楼
9楼2008-09-04 16:12:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 deity214 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +6 张zz111 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by 左的岸
[考研] 292求调剂 +13 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 14/700 2026-03-27 15:40 by caszguilin
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 考研调剂 +10 呼呼？~+123456 2026-03-24 10/500 2026-03-27 11:46 by wangjy2002
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 6/300 2026-03-27 10:15 by barness
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 305分求调剂（食品工程） +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭