应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 关于牛血清蛋白浓度测定的问题
171/2返回列表12下一页
查看: 2324  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

米可儿come

木虫 (正式写手)

[求助] 关于牛血清蛋白浓度测定的问题 已有2人参与

我高分子材料专业的，在做一些抗蛋白吸附的材料，在具有微孔的聚偏氟乙烯膜表面镀上亲水的coating，可以起到抗蛋白吸附的作用。在性能测试的过程中，我配制了1mg/ml 的牛血清蛋白溶液（BSA溶液），并绘制了BSA的标准曲线，用的是紫外分光光度法测的蛋白浓度，波长设置的是280nm。然后我将我测材料放在1mg/ml 的BSA溶液中浸泡并轻微振荡，保持24h，温度为室温 30℃，然后测溶液中蛋白的浓度，但结果发现测得的浓度均大于初始浓度，不是偶然，已经做了很多组实验，目前我排除了多个可能导致吸光度增大的因素，如coating在浸泡过程中有溶出物增加吸光度，和基底材料中溶出物，以及亲水镀层吸水使溶液浓缩，但是这些经实验和论证后均不成立，是不是问题出在蛋白本身上，我查资料BSA保存需冷藏，不知道30℃放置24h会不会导致蛋白变性，变性会导致吸光度增加吗

有对这方面了解的请帮我指点一下，这个问题已经困扰了我很久，接下来的实验不知道该怎么办了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-08-06 14:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
米可儿come: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-08-18 10:40:50
30度，24h,这个温度太高，BSA应该不会变性，但是应该会降解，降解的话，蛋白吸光值会变大。另外用G-250法测浓度应该比测280精确很多！
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2015-08-18 10:05:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

米可儿come

木虫 (正式写手)
给自己顶一下
回复此楼
2楼2015-08-08 22:19:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米可儿come

木虫 (正式写手)
顶
3楼2015-08-08 22:19:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米可儿come

木虫 (正式写手)
拜托帮帮忙
回复此楼
4楼2015-08-08 22:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米可儿come

木虫 (正式写手)
5楼2015-08-08 22:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★
米可儿come: 金币+1 2015-08-11 10:23:14
本帖内容被屏蔽
6楼2015-08-09 23:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★
米可儿come: 金币+1, ★有帮助 2015-08-18 10:41:42
本帖内容被屏蔽
7楼2015-08-09 23:37:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米可儿come

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-09 23:37:00
一般我们测蛋白浓度都是用考染方法测的，还有，如果你要测280的光吸收，你必须用石英比色皿，否则OD值肯定大，因为普通的玻璃比色皿在紫外波段是有光吸收的。考染是测OD595，玻璃就行

我用的是石英比色皿，我看过类似做这个材料蛋白的吸附的都是用的这种方法，选择280nm紫外测试。
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-11 10:24:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米可儿come

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-09 23:37:36
你自己百度蛋白浓度测定方法，考染，BCA等等，很多选择

我用这个方法主要是觉得比较简单方便，我不是专业生物方向，这个数据也不作为主要数据，所以只要有大致的趋势就可以，不需要特别精准的要求，如果以这个为前提，这个方法可不可行，如果不可行，我的问题应该出在哪里呢，如果我配制溶液的水不是超纯水会不会对蛋白质的性质影响很大
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-11 10:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★
米可儿come: 金币+1 2015-08-18 10:42:06
本帖内容被屏蔽
10楼2015-08-11 11:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 米可儿come 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:23 by Xc2FxHsHkBNc
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 4/200 2026-11-07 16:28 by Xc2FxHsHkBNc
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭