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吕稀稀子

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物花粉RNA提取总是降解,反转以后pcr没有目标条带只有二聚体 已有1人参与

本人是分子实验新手,最近提取香梨花粉和花柱的RNA,降解的很厉害,用的是天恩泽RNA柱式2.0试剂盒,也用过艾德莱RN38试剂盒。效果都不好,好不容易有一个质量一般的,反转后PCR好多次都没有目标条带,情况很不稳定,有两次P出目标带,但很淡。求解~
希望有提过花粉花柱RNA的大神指点一下~ 金币全部贡献~

植物花粉RNA提取总是降解,反转以后pcr没有目标条带只有二聚体
15.8.03 香梨 花粉12 花柱34.JPG
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sunyaolove

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.你是液氮研磨吧,楼主要是女生就找个男生,大力的那种,把样品完全粉成白色细粉。
2.样品一定要多加,说明书说加多少,你就二倍的加。
3.PCR你模板浓度稀释下5倍,10倍,20倍,50倍多试试。
3.引物而具体太多,降低下退火温度。
4.不是有批出来的吗,用那个当模板,再批次。
2楼2015-08-11 17:59:53
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