应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白胶问题
111/2返回列表12下一页
查看: 1331  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白胶问题 已有3人参与

跑蛋白胶，见图，什么情况，求高人指点

蛋白胶问题
图片1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
1楼 2015-08-05 11:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-05 23:03:47
1.样品处理的问题或running burfer的问题
2.看你的Marker也有一点M状，说明胶也有问题。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2015-08-05 12:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yywang24

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-05 23:04:03
胶凝固的不太好，导致跑胶时条带弯曲，配好分离胶浓缩胶多放一会儿
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-08-05 16:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

彭清LC

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、由marker可以知道你的胶交联度不好，建议调整配方，分离胶凝固的久一点，环境温度尽量高一点；
2、可能是你的缓冲液的问题，缓冲液中是否离子浓度过高与否，对蛋白胶的蛋白条带影响比较大；
3、还有一种可能是你的实验室所在电压不稳造成的，先80V，后120~160V，建议电压不要太高，胶浓度可以适当提高一点。
以上三点只是可能的原因，不排除其他原因，你可以一一去排除验证，希望能帮到你。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-08-07 08:24:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

戚海清

铜虫 (初入文坛)
混合不均
回复此楼
努力争取，不言放弃
4楼2015-08-06 09:31:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-05 12:07:45
1.样品处理的问题或running burfer的问题
2.看你的Marker也有一点M状，说明胶也有问题。

running burfer的问题，比如呢
胶有什么问题，能不能具体点啊
赞一下 回复此楼
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
5楼2015-08-06 11:22:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 戚海清 at 2015-08-06 09:31:33
混合不均

什么混合不均？
回复此楼
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
6楼2015-08-06 11:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-05 12:07:45
1.样品处理的问题或running burfer的问题
2.看你的Marker也有一点M状，说明胶也有问题。

样品每次处理都一样，但是十次差不多一次正常，样品处理有问题的话，为什么会偶尔正常一次呢
赞一下 回复此楼
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
7楼2015-08-06 11:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

admission

木虫 (著名写手)
很可能是缓冲液的问题，之前遇到过类似的问题。下次缓冲液新配，胶凝固30分钟以上，看看行不行

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-07 08:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 彭清LC at 2015-08-07 08:24:52
1、由marker可以知道你的胶交联度不好，建议调整配方，分离胶凝固的久一点，环境温度尽量高一点；
2、可能是你的缓冲液的问题，缓冲液中是否离子浓度过高与否，对蛋白胶的蛋白条带影响比较大；
3、还有一种可能是 ...

您好，感谢解答
1、配方是12%，网上查的，如何调整，过硫酸铵浓度影响大吗
2、缓冲液是指running buffer吧，就是Tris，Glycine和SDS，离子浓度不会高啊
3、电压稳不稳我不知道，但是都是先80V，后120~160V这样跑的，为什么要提高胶浓度啊，提高分辨率吗还是怎么的
赞一下 回复此楼
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
10楼2015-08-07 10:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hanwei1150 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭