24小时热门版块排行榜    

查看: 880  |  回复: 4

ackee

新虫 (小有名气)

[交流] 真菌敲除,PCR验证问题。 已有2人参与

用同源重组的方法敲除一个真菌的基因,PCR验证发现敲除成功,用抗性基因的引物与同源臂上的引物可以P出来,其代谢产物也有变化。
但是我把这个菌株再次培养后,PCR验证就失败了,试了很多次都P不出来,但是代谢产物的变化还是和以前一样。
请问这是为什么?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

敲除验证

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痞子无敌

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主现在问题解决了吗
当你当你的眼睛眯着笑
2楼2016-05-21 11:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丶简简单单

无虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可能就没有敲掉基因。建议重新做敲除。我做过原核的敲除,一开始验证是对的,接下来做抗性消除的时候,大半个月发现做不来,回过头又验证了下,发现没有完全敲除,然后重新做了,接下来挺顺利的。
3楼2016-05-21 16:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ackee

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痞子无敌 at 2016-05-21 11:48:29
请问楼主现在问题解决了吗

换了个酶,就P出来了,可能提取DNA的时候有杂质

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-22 17:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ackee

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 丶简简单单 at 2016-05-21 16:00:45
你可能就没有敲掉基因。建议重新做敲除。我做过原核的敲除,一开始验证是对的,接下来做抗性消除的时候,大半个月发现做不来,回过头又验证了下,发现没有完全敲除,然后重新做了,接下来挺顺利的。

换个酶就P出来了

发自小木虫Android客户端
5楼2016-05-22 17:42:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ackee 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 材料工程(专)一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见