24小时热门版块排行榜    

查看: 974  |  回复: 4

ackee

新虫 (小有名气)

[交流] 真菌敲除,PCR验证问题。 已有2人参与

用同源重组的方法敲除一个真菌的基因,PCR验证发现敲除成功,用抗性基因的引物与同源臂上的引物可以P出来,其代谢产物也有变化。
但是我把这个菌株再次培养后,PCR验证就失败了,试了很多次都P不出来,但是代谢产物的变化还是和以前一样。
请问这是为什么?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

敲除验证

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痞子无敌

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主现在问题解决了吗
当你当你的眼睛眯着笑
2楼2016-05-21 11:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丶简简单单

无虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可能就没有敲掉基因。建议重新做敲除。我做过原核的敲除,一开始验证是对的,接下来做抗性消除的时候,大半个月发现做不来,回过头又验证了下,发现没有完全敲除,然后重新做了,接下来挺顺利的。
3楼2016-05-21 16:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ackee

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痞子无敌 at 2016-05-21 11:48:29
请问楼主现在问题解决了吗

换了个酶,就P出来了,可能提取DNA的时候有杂质

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-22 17:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ackee

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 丶简简单单 at 2016-05-21 16:00:45
你可能就没有敲掉基因。建议重新做敲除。我做过原核的敲除,一开始验证是对的,接下来做抗性消除的时候,大半个月发现做不来,回过头又验证了下,发现没有完全敲除,然后重新做了,接下来挺顺利的。

换个酶就P出来了

发自小木虫Android客户端
5楼2016-05-22 17:42:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ackee 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见