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我L小狼

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问Overlap-PCR大家用什么酶? 已有6人参与

请问一下大家,Overlap的PCR结果一直没有
之前问一些人说Taq酶扩增以后会在后面加PolyA影响overlap效果

请问这个影响真的很大吗?
大家做overlap都用的什么酶?
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用过几种聚合酶,觉得没什么问题~
2楼2015-07-31 10:28:04
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
我L小狼(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-02 22:21:50
overlap的话先用普通的pfu试试,不行的话买t a k a r a的primestar HS,他家的酶做overlap效果很好,注意是HS,不是MAX。
如果你是土豪,请忽略前四分之一句。
初来乍到,请多指教
3楼2015-07-31 12:29:54
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

4楼2015-08-02 09:54:16
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love犬夜叉

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

高保真酶,我做过定点突变,用的是Takara的pfu酶,最后做出来了
justloveinuyasha
5楼2015-08-03 11:27:15
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个无所谓吧,我用的就是r-taq或者-Ex-taq
下雨天就算没有伞,我也要学会努力奔跑!
6楼2015-08-03 14:34:10
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用PFU,可能问题的关键不在酶,在于你的设计,重叠尽量多些,不知道你搞了多少扁平
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
7楼2015-08-03 20:38:40
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