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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问Overlap-PCR大家用什么酶？
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我L小狼

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问Overlap-PCR大家用什么酶？ 已有6人参与

请问一下大家，Overlap的PCR结果一直没有
之前问一些人说Taq酶扩增以后会在后面加PolyA影响overlap效果

请问这个影响真的很大吗？
大家做overlap都用的什么酶？
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1楼 2015-07-31 09:55:48
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用过几种聚合酶，觉得没什么问题~
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2楼2015-07-31 10:28:04
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
我L小狼(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-02 22:21:50
overlap的话先用普通的pfu试试，不行的话买t a k a r a的primestar HS，他家的酶做overlap效果很好，注意是HS，不是MAX。
如果你是土豪，请忽略前四分之一句。
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初来乍到，请多指教
3楼2015-07-31 12:29:54
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2015-08-02 09:54:16
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love犬夜叉

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

高保真酶，我做过定点突变，用的是Takara的pfu酶，最后做出来了
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justloveinuyasha
5楼2015-08-03 11:27:15
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个无所谓吧，我用的就是r-taq或者-Ex-taq
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
6楼2015-08-03 14:34:10
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用PFU，可能问题的关键不在酶，在于你的设计，重叠尽量多些，不知道你搞了多少扁平
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
7楼2015-08-03 20:38:40
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