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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

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水岸云边

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 87
帖子: 3
在线: 4.1小时
虫号: 3177133
注册: 2014-05-03
专业: 肿瘤化学药物治疗

[求助] miRNA RT-PCR溶解曲线以及扩增效率已有1人参与

新手求助：刚做pcr，我用的是SYBR法，样本是提取》18bp的总RNA然后，加尾法反转录，PCR扩增CT值都在25-30之间，跑溶解曲线，结果目的产物溶解曲线的TM值都在65-70之间，TM值明显偏小，U6内参是试剂盒自带的，扩增出来也是一样，TM值70，扩增出来的应该不是目的产物，可能的原因是哪些

P50729-145710.jpg

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1楼 2015-07-30 22:41:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lihu0112

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 116.5
散金: 12
红花: 1
帖子: 62
在线: 30.7小时
虫号: 1365856
注册: 2011-08-11
性别: GG
专业: 抗感染药物药理

【答案】应助回帖

1、PCR产物跑电泳和设计的目的片段比大小
2、TM值小于80一般认为是引物二聚体
3、咨询卖试剂盒的公司，技术支持，看他们的质控报告TM值。

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