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水岸云边

新虫 (初入文坛)

[求助] miRNA RT-PCR溶解曲线以及扩增效率 已有1人参与

新手求助:刚做pcr,我用的是SYBR法,样本是提取》18bp的总RNA然后,加尾法反转录,PCR扩增CT值都在25-30之间,跑溶解曲线,结果目的产物溶解曲线的TM值都在65-70之间,TM值明显偏小,U6内参是试剂盒自带的,扩增出来也是一样,TM值70,扩增出来的应该不是目的产物,可能的原因是哪些

miRNA RT-PCR溶解曲线以及扩增效率
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lihu0112

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、PCR产物跑电泳和设计的目的片段比大小
2、TM值小于80一般认为是引物二聚体
3、咨询卖试剂盒的公司,技术支持,看他们的质控报告TM值。
2楼2015-09-07 09:08:27
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