应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位老师 pcr产物有引物二聚体 会影响测序吗?
111/2返回列表12下一页
查看: 5077  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

iswearit

铁虫 (初入文坛)

[求助] 各位老师 pcr产物有引物二聚体 会影响测序吗? 已有9人参与

图片中marker从下到上分别是50bp,100bp,150bp,200bp,250bp,300bp,350bp,400bp,500bp.

各位老师 pcr产物有引物二聚体 会影响测序吗?
51-60(2).JPG


各位老师 pcr产物有引物二聚体 会影响测序吗?-1
51-60(3).JPG
回复此楼

» 猜你喜欢
先得到的未必是好的
1楼 2015-07-30 20:13:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
iswearit(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-02 22:20:05
你的目的条带是多少？400bp？如果是的话，那就扩出来了呀？只是特异性不好，提高2度退火试试。如果不是，那亮带也不能是引物二聚，太大了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-07-31 18:08:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

表弟爱网游

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
iswearit(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-02 22:20:40
如果你的目的片段大小和引物二聚体大小差不多，那么测序会有影响。公司帮你纯化的时候，无法除去引物二聚体，有杂质，测序的峰图就会出问题，结果会失败。
赞一下(1人) 回复此楼
当一切如飞舞的落叶坠落，惋惜之余，也要学会原谅与释怀
8楼2015-08-02 22:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:21:32
你怎么确定是引物二聚体而不是非特异扩增？建议优化下PCR条件，提高退火温度看看。
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-30 22:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

打败番茄炒蛋

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物二聚体大部分比较小，小于100bp吧
赞一下 回复此楼
天生自弃难丽质
3楼2015-07-31 15:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iswearit

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 卡维斯 at 2015-07-31 18:08:59
你的目的条带是多少？400bp？如果是的话，那就扩出来了呀？只是特异性不好，提高2度退火试试。如果不是，那亮带也不能是引物二聚，太大了。

目的条带不到四百 也就是最亮上面那条带
赞一下 回复此楼
先得到的未必是好的
5楼2015-08-01 09:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
iswearit(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-02 22:20:15
测序是单引物pcr，正常情况下没有问题，只要你的质粒纯。
赞一下 回复此楼
活着就要让人感受到你的存在。
6楼2015-08-01 21:17:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
iswearit(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-02 22:20:26
你的应该是非特异性产物吧！引物二聚体大小一般都很小的～非特异性条带对测序是有影响的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-02 18:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你测序只用一条引物啊，跟谁二聚啊？可以的，不行再换个方向引物测，反正不贵
赞一下 回复此楼
努力打败一切
9楼2015-08-03 12:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haze12344

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以纯化目的片段再测序就没问题
赞一下 回复此楼
生物你好
10楼2015-08-03 17:27:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 iswearit 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 06:21 by gy1nBQXYQJqL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 05:13 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +4 gouxfjh 2026-08-28 4/200 2026-08-29 04:46 by alongwaytogo
[基金申请] 国自然评审意见 +11 wangmingqi 2026-08-28 15/750 2026-08-29 00:17 by fangyl2005
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭