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大肠杆菌与酵母体系中,怎么进行表达外源蛋白的膜定位?已有3人参与
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我需要做的事情就是将外源蛋白表达在细胞外膜上,不知道如何定位?我现在研三,刚开题,除看文献外没有任何基础,时间紧迫... 以下思路: 1.LamB蛋白153位点插入外源蛋白,但是我不知道难度如何,操作工具是否难获得,能不能成功; 2.信号肽-外源蛋白-lgA等膜上蛋白系统,如OmcP、a凝集素等,这套系统信号肽,膜锚定蛋白选择什么容易成功,具体序列,我也不知道; 3.是否存在质粒有这种特殊功能的,我只知道有分泌蛋白表达系统,如果有好获得么,时间紧迫; 4.其他一些思路或建议,比如外源蛋白的特殊要求,整个实验中需要注意的地方等等,求指导... 另外询问一下,自己设计的基因序列,在大肠杆菌、酵母中表达的情况,能否表达(不要求活性的情况下),会不会被水解掉 还是有什么高招,可以指导我怎么将自己设计的基因序列在细菌、真菌的细胞外膜上表达。 不胜感激,联系方式:290602987@qq.com,重点是思路虽然清楚,但可行性不了解,并且实验工具获得难度不清楚,操作难度不清楚... 时间紧迫!别问我前两年干什么了,上过研的都应该知道,我只能说我不是玩过来的,其他话不好说... |
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