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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

[交流] 怎样验证蛋白与小分子化合物是否结合?已有10人参与

大家好:有没有人知道验证小分子化合物是否与蛋白质结合的实验方法?想做结晶,但周期太长,又不好做,有没有简单的方法?急求!谢谢!
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yushhsioc

铁虫 (正式写手)


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蛋白水平几个assay先测一下,或者是再加上细胞水平,用pulldown实验,在小分子上面适当部位接上biotin,不影响活性的基础上,看看能不能把靶向蛋白拉到。
或者有条件的可以用核磁共振来鉴定。
3楼2015-07-29 09:01:11
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yushhsioc

铁虫 (正式写手)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by 竹林樱草 at 2015-07-29 14:33:39
之前没接触过pulldown实验,查过后认为是验证两个蛋白或多个蛋白的结合实验,但是我需要验证的是小分子化合物与蛋白结合,pulldown实验不行吧?...

pulldown是用来看小分子和蛋白结合的,和另外一个蛋白没关系。当然,要看小分子适不适合接个biotin,还保留了结合活性,还挺麻烦的,除非学术界搞搞。看你的情况,小分子和蛋白都已经准备好了,那就试条件长晶体呗。最多用ITC或其它验证一下就好了。
6楼2015-07-30 10:37:27
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